急性腦梗死患者阿司匹林抵抗與血小板miRNA的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：
　　腦梗死是發(fā)病率最高的一種腦血管疾病，是成年人致殘的主要原因，也是人類僅次于惡性腫瘤和心血管疾病的第三大致死原因。其發(fā)病率逐年上升，致死致殘率較高，預(yù)后差，給社會和家庭造成了沉重的負(fù)擔(dān)。腦梗死的病因眾多，發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，遺傳因素和環(huán)境因素的相互作用是發(fā)病的中心環(huán)節(jié)。急性腦血栓形成時，血小板的活化、粘附和聚集是重要的病理過程，因此抗血小板聚集的藥物如阿司匹林等因?qū)δX血栓形成病變中具有肯定的治療作用而被廣泛應(yīng)用于臨床。

2、但是阿司匹林抵抗(AR)的發(fā)生限制了其臨床療效，其目前的具體機(jī)制尚未明確。血小板在急性腦梗死的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用，近來有研究發(fā)現(xiàn)微小RNA與血小板的活性密切相關(guān)。血小板中存在大量miRNA，其可通過作用于靶mRNA進(jìn)而調(diào)節(jié)靶蛋白的表達(dá)，從而在機(jī)體正常生理及病理過程中發(fā)揮著重要作用。但目前尚無有關(guān)miRNA與急性腦梗死患者阿司匹林抵抗相關(guān)性的研究。
　　研究目的：
　　研究miR-126，miR-200b，miR-223以及

3、miR-495和它們已知的靶蛋白在山東地區(qū)漢族人群中的表達(dá)情況，探討急性腦梗死患者阿司匹林抵抗與血小板miRNA的相關(guān)性，并從遺傳學(xué)角度尋找阿司匹林抵抗發(fā)生的機(jī)制。
　　研究方法：
　　采用病例-對照的研究方法，選擇51例急性腦血栓形成患者作為病例組，60例非腦梗死、心肌梗死的健康體檢者作為對照組。對每位受試對象進(jìn)行年齡、性別、身高、體重、血壓、體重指數(shù)等一般指標(biāo)記錄與計(jì)算，記錄各個受試對象的高血壓史、高脂血癥史、冠心病史和

4、糖尿病史、吸煙史等腦血管病的危險(xiǎn)因素。用1∶9的枸櫞酸鈉真空抗凝采血管采集參與者的清晨空腹血進(jìn)行血細(xì)胞分析和空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)測定。采用流式細(xì)胞儀檢測miRNA的來源，經(jīng)血小板聚集實(shí)驗(yàn)區(qū)分阿司匹林抵抗(AR)和非阿司匹林抵抗(NAR)，并分別采用RT-PCR和Western Plot實(shí)驗(yàn)檢測每個受試者的血小板miRNA水平和相關(guān)蛋白表達(dá)。
　　研究

5、結(jié)果：
　　1.通過對一般資料的統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn)，腦梗死病例組患有糖尿病，冠心病，高血壓以及吸煙，飲酒的比例明顯高于對照組，收縮壓，空腹血糖，以及血小板體積分布寬度水平也高于對照組，高密度脂蛋白水平則低于對照組，兩組之間的差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　2.51例腦梗死病例組中有8例AR，發(fā)生率為16％，60例對照組中AR有16例，發(fā)生率為27％，兩者之間的差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.16，P＞0.05)。3.病例

6、組的血小板miR-126水平低于對照組（加AS前），兩者之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.所有研究對象中，AR和NAR的血小板miR-126水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　5.病例組中AR和NAR之間血小板miR-126水平也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　6.對照組中AR的血小板miR-126的水平明顯高于NAR(P＜0.05)，經(jīng)二元Logistic回歸分析，血小板miR-126是對照組

7、發(fā)生AR的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(0R=0.65，95％CI=1.22～30.05,P=0.03)。
　　7.病例組中血小板miR-200b和miR-495的水平顯著高于對照組，兩者之間的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　8.病例組中，NAR中miR-200b和miR-495的水平明顯高于AR，兩者之間的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　9.對照組中，AR中的miR-223水平顯著高于NAR，兩者之間的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

8、義(P＜0.05)。
　　10.血小板中的PRKAR2B和KLHL5的表達(dá)分別與其相應(yīng)的miRNA:miR-200b和miR-495的表達(dá)水平成負(fù)相關(guān)。腦梗死病人中的PRKAR2B和KLHL5的表達(dá)明顯低于對照組（P＜0.05）;而在對照組中，AR中PRKAR2B和KLHL5的表達(dá)顯著高于NAR(P＜0.05)。
　　11.血小板中VASP的表達(dá)與PRKAR2B無相關(guān)性(p＞0.05)。
　　12.在所有研究對象中，C