NHEs基因在LPS致小鼠腹瀉腸管中的表達.pdf

1、鈉/氫交換泵NHEs是存在于真核細胞中的一種重要離子跨膜轉(zhuǎn)運載體，該蛋白載體有多種功能，主要功能有調(diào)節(jié)細胞內(nèi)pH、控制細胞體積大小、負責鈉/氫離子的轉(zhuǎn)運、調(diào)節(jié)細胞周期及細胞增殖等多種功能。NHEs活性改變會引起機體Na+吸收障礙，導致腹瀉，調(diào)節(jié)NHEs活性將是預防和治療腹瀉的一個新方向。目前關于NHEs基因與腸管分泌性腹瀉的研究尚少，本文在前人研究的基礎上利用LPS建立動物急性腹瀉模型，通過動物精神狀態(tài)、糞便排放、腸管蠕動和組織形態(tài)學變

2、化來判定模型的建立;利用分子生物學的方法（qRT-PCR）對動物不同腸管NHEs基因進行定量檢測，并分析模型組和對照組腸管NHEs基因的差異表達。結果如下:
　　LPS注射后1h和8h組均出現(xiàn)不同程度的腹瀉，精神萎靡，采食量有所下降，與對照組形成明顯差別;攝像觀察發(fā)現(xiàn):試驗組小鼠腸管運動較劇烈，腸系膜靜脈充血，腸壁明顯水腫，隨著注射時間的延長，水腫現(xiàn)象更為嚴重，腸系膜靜脈血管，呈紫黑色;組織學觀察結果顯示，LPS注射1h后，黏膜及

3、絨毛排列輕度紊亂，絨毛縮短，無黏膜變性、壞死，出現(xiàn)上皮細胞下間隙增大，腸腺輕度受損，毛細血管充血;注射后8h，小腸絨毛明顯水腫，絨毛排列紊亂，絨毛黏膜糜爛脫落，腸腺受損，毛細血管發(fā)生明顯充血，有炎癥細胞浸潤;提示LPS成功地誘導小鼠發(fā)生了腹瀉。
　　qRT-PCR對NHEs基因進行定量檢測結果發(fā)現(xiàn):小鼠十二指腸、空腸、回腸、結腸均有NHE2、NHE3、NHE8基因的表達;NHE2基因表達水平高低:空腸＞十二指腸=結腸＞回腸;NHE

4、3基因表達水平高低:結腸＞十二指腸=空腸＞回腸;NHE8基因在各腸管表達一致;LPS注射1h后上調(diào)十二指腸NHE2基因表達，8h下調(diào)其表達;LPS能下調(diào)回腸、結腸NHE2基因表達，上調(diào)空腸NHE2基因表達，且依賴作用時間;LPS均上調(diào)十二指腸、空腸、回腸和結腸NHE3基因表達，且依賴作用時間，8h均達到差異極顯著水平;LPS注射1h后上調(diào)十二指腸NHE8基因表達，8h下調(diào)其表達; LPS上調(diào)空腸、回腸NHE8基因表達，下調(diào)結腸NHE8基