基于磁性納米顆粒、納米磷酸鈣和超支化聚合物復合載體的基因轉染研究.pdf

1、基因治療的成功有賴于高效、安全和靶向的載體系統(tǒng)，將目標DNA轉移至靶細胞核內進行表達。磁性納米顆粒可在外加磁場的作用下，將DNA快速牽引至細胞表面，這種“磁轉染”(magnetofection)技術已成為非病毒基因載體中一個新的發(fā)展分支。磷酸鈣是一種傳統(tǒng)的基因轉染材料，轉染效率較低但是生物相容性好，如何改進使其克服可控性差的缺點是載體研究者的目標。此外，陽離子聚合物載體在基因轉染中的應用正日益廣泛，但是關于其構效關系的研究還未深入。為此

2、，我們制備了一系列不同表面電荷修飾的磁性納米顆粒、形態(tài)可控的納米磷酸鈣及其與磁顆粒的復合材料、不同支化度的聚酰胺大分子，用于基因的可控傳遞和表達。完成的工作包括以下幾個方面：
　　 (1)分別制備了聚乙烯亞胺(PEI)、羧甲基葡聚糖、檸檬酸、氨基硅烷、甜菜堿修飾的四氧化三鐵納米顆粒，將這些磁性納米顆粒、PEI和DNA復合在一起用于基因轉染。結果表明，以上各種表面修飾的磁性納米顆粒，只要磁顆粒表面有足夠的電荷，都能使DNA快速富集

3、到細胞的表面，起到增強轉染的作用。
　　 (2)制備了磷酸鈣納米球、羥基磷灰石納米棒以及磷酸鈣—四氧化三鐵復合納米材料，能通過鈣離子的調節(jié)，高效地載帶DNA并將其轉移進細胞內表達，效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的磷酸鈣共沉淀轉染載體。
　　 (3)合成了一系列不同支化度的聚酰胺大分子(PMA)，能與DNA通過靜電復合。改變PMA的支化度，會顯著地影響其與DNA復合的能力、細胞毒性以及轉染效率。支化度最大的PMA其轉染效率與PEI相當。