導流雜交基因芯片技術在HPV感染檢測及宮頸病變診斷中的實驗與應用研究.pdf

1、目的：1.評價導流雜交基因芯片技術(hybriMax)在宮頸人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染檢測及宮頸病變診斷中的應用價值；2.了解不同級別宮頸病變患者常見HPV感染基因型(又稱亞型)；3.評價最常見HPV亞型發(fā)生宮頸病變的風險；4.判斷多重感染與宮頸病變程度的關系。 方法：1.在中日友好醫(yī)院婦產(chǎn)科行宮頸癌篩查女性4200例中，選取細胞學異常者253例及細胞學正常以往無宮頸病變史者57例，采用導流雜交基因芯片技術進行宮頸細胞HPV6

2、、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304(81)等21種亞型的分型檢測，同時用雜交捕獲二代(HC-Ⅱ)進行13種(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)高危型HPV的檢測，對兩者結果不符合的標本進行基因測序；對上述患者中的101例宮頸組織標本進行HPV16/18原位雜交；比較不同方法檢測結果的一致性。2.在原基

3、礎上擴大樣本，自7520例宮頸癌篩查女性中選取異常者共453例，正常者共138例，按組織病理結果分為慢性炎癥組、宮頸濕疣組、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組、宮頸癌組。對上述研究對象用HybriMax法進行21種HPV亞型的分型檢測，計算各基因型在不同病變類型中的陽性率，常見基因型發(fā)生CIN的危險度比值比(OR)及多重感染在不同病變類型中的比例。 結果：1.HybriMax與HC-Ⅱ兩種方法對13種高危型HPV感染的檢出結果

4、一致性良好，總符合率92.3％，宮頸癌組符合率100％；Kappa指數(shù)(KI)總體為0.796，正常組0.766，炎癥組0.768，宮頸濕疣組0.791，CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ組分別為0.654，0.478，1.0，一致性好。結果不一致標本測序結果60％支持HybriMax，28％支持HC-Ⅱ。2.HybriMax對宮頸病變診斷的靈敏度與HC-Ⅱ無差異。3.HybriMax與HPV16/18亞型原位雜交檢測結果符合率為89.1％，KI=0.7

5、76。4.用導流雜交法檢測的宮頸病變患者HPV陽性率隨病變級別增加而增加，最常見的基因型為16、18、52、58、33、31。5.HPV16陽性率隨病變級別的增加迅速上升，HPV18在CINⅢ及宮頸癌組中的陽性率明顯高于炎癥組、CINI、Ⅱ組。HPV52、58在CIN各組中的陽性率均高于正常組和炎癥組，甚至宮頸癌組。最常見6種基因型發(fā)生CIN的OR值均大于1。6.宮頸病變患者多重感染的比例隨病變級別增加而增加，分別為正常組19％，炎癥組

6、35.8％，CINⅠ組45.9％、CINⅡ組54.9％、CINⅢ組59.5％。 結論：1.導流雜交基因芯片技術與HC-Ⅱ及原位雜交檢測結果一致性良好，對宮頸病變的檢出率與HC-Ⅱ一致，所得分型結果與世界范圍的報道一致，對多重感染的檢出率高，因而是HPV分型檢測的理想方法。2.HPV16、18、52、58、33、31為宮頸病變患者最常見的6種感染亞型，前5種與宮頸癌患者一致。3.HPV16致病力強，HPV18陽性患者可能較少經(jīng)歷C