大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導分化為神經(jīng)元樣細胞及移植治療腦梗塞模型鼠的研究.pdf

1、中山大學766733碩士學位論文大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導分化為神經(jīng)元樣細胞及移植治療腦梗塞模型鼠的研究答辯委員會主席：答辯委員會成員：專業(yè)：碩士研究生：導師：病理生理學王穎鄧宇斌教授教授教授教授教授教授2005年5月廣州礙ok癭仆藤簇參侈廠爭葉亂叼中山大學碩==學位論文大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導分化為神經(jīng)元樣細胞及移植擼療腦梗塞模型鼠的研究前研究的熱點。目前，已有研究將MSCs及由其誘導的神經(jīng)元樣細胞用于多種心腦血管疾病的治療，如心肌梗死

2、、缺血缺氧性腦病等。以上研究為將由MSCs誘導分化的神經(jīng)元樣細胞用于治療腦梗塞帶來曙光和生機，深入探討MSCs分化為神經(jīng)元樣細胞對損傷腦組織的修復以及其功能恢復的機制，進而評估其有效性、安全性和可靠性，具有積極的臨床意義。那么將由骨髓間充質(zhì)干細胞誘導分化而來的神經(jīng)元樣細胞局部立體定位注射于腦梗塞部位能否夠在功能上替代、彌補已損失腦部神經(jīng)元的功能能否有效促進腦梗塞模型鼠的肌力、平衡能力等整體運動功能的恢復以及能否促進其學習及記憶能力的恢復

3、上述功能恢復的水平有無統(tǒng)計學意義本研究擬于針對此目的應用干細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，應用丹參酮IIA誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞為神經(jīng)元樣細胞，制作大鼠大腦中動脈阻塞模型，通過大腦局灶立體定位注射誘導細胞，應用神經(jīng)學評分、運動功能檢測、學習記憶功能檢測、病理學檢測及免疫組化和熒光相結(jié)合的方法探討神經(jīng)元樣細胞移植對腦梗塞模型鼠神經(jīng)功能恢復的影響。本課題的研究包括以下三部分：第一部分大鼠骨髓間充質(zhì)于細胞的分離、擴增與鑒定1方法頸椎脫

4、臼處死大鼠后，75％酒精消毒，于超凈工作臺無菌條件下取其兩只股骨，剪除一側(cè)骨垢端，暴露骨髓腔，用一次性注射器吸取lml15ml全培養(yǎng)液反復沖洗骨髓腔，沖出其中的骨髓細胞于平皿中，將收集的細胞懸液反復用注射器輕輕抽吸數(shù)次，將其打散成單細胞懸液，然后收集細胞離心，棄盡上液，用LDMEM(15％FBS)培養(yǎng)液重新懸浮細胞，將其接種于25cm2的塑料培養(yǎng)瓶中，密度為每瓶2X107個細胞，略旋松瓶口，放置二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置原代培養(yǎng)。待rMSCs