重組人角質(zhì)細胞生長因子-2對燙傷創(chuàng)面愈合的影響及其細胞調(diào)控機制.pdf

1、角質(zhì)細胞生長因子-2(Keratinocyte growth factor-2,KGF-2)又稱成纖維細胞生長因子-10（Fibroblast Growth Factor-10，F(xiàn)GF-10），是成纖維細胞生長因子家族中的新成員，能特異性促進上皮細胞增殖、分化和移行。重組人KGF-2（rhKGF-2）是以大腸桿菌為載體，優(yōu)化密碼子后合成1類基因工程新藥。本課題研究rhKGF-2對大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合的影響，同時探討細胞調(diào)控機制。

2、 建立大鼠深Ⅱ度燙傷模型，每天局部給藥1次，連續(xù)15d，每4d測量傷口面積并計算愈合率，第16天觀察新生表皮厚度、移行距離及面積。rhKGF-2 5、15、45μg/傷口均能不同程度提高傷口愈合率及增加新生表皮的厚度、移行距離和移行面積（P<0.01）。皮膚標本角蛋白免疫組化實驗顯示rhKGF-2治療后新生表皮的角質(zhì)層厚度增加，從形態(tài)上更直觀證明rhKGF-2能顯著促進新生表皮的生長。 通過體外培養(yǎng)永生化人角質(zhì)細胞HaCaT研

3、究rhKGF-2對細胞增殖的影響。rhKGF-2（1～100ng/ml）均顯著促進HaCaT細胞增殖，且呈濃度依賴性，HaCaT細胞增殖率與rhKGF-2的濃度對數(shù)呈線性關系（R2=0．965，P<0．05）。rhKGF-2（1～100ng/ml）刺激下HaCaT細胞集落形成率也增加（P<0．05），形成的集落較大，集落內(nèi)細胞呈明顯的增殖形態(tài)，細胞多呈星狀，胞內(nèi)染色質(zhì)豐富。而低濃度rhKGF-2（1ng/ml、10ng/ml）對成纖維細

4、胞NIH3T3細胞無明顯影響。提示rhKGF-2是表皮細胞特異性分裂原，一定劑量的rhKGF-2不易產(chǎn)生病理性疤痕。 此外，rhKGF-2（100ng/ml）刺激后進入S期的HaCaT細胞比例顯著增加，G0G1期比例降低（P<0.01）。rhKGF-2能激活ERK磷酸化，顯著促進活化的ERK進入細胞核。提示rhKGF-2可能激活ERK信號通路，調(diào)控細胞周期，從而促進HaCaT細胞增殖。 通過建立HaCaT細胞刮傷模型進一