脂肪組織視黃醇結合蛋白4基因表達調控的研究.pdf

1、本文分兩部分，第一部分：肥胖及2型糖尿病患者脂肪組織視黃醇結合蛋白4 mRNA的表達及調控。
　　 目的：通過測定肥胖及2型糖尿病患者皮下和腹內脂肪組織RBP4mRNA的表達，研究不同糖脂代謝人群皮下和腹內脂肪組織RBP4 mRNA表達的差異，探討影，NRBP4表達調控的因素。
　　 對象與方法：篩選因非代謝性疾病而接受腹部擇期手術的正常體重正常糖調節(jié)（NW-NGT）、單純肥胖（OB）、T2DM患者（T2DM）各9例，取

2、皮下和腹內脂肪組織，檢測RBP4 mRNA的表達；對NW-NGT者腹內脂肪組織進行體外培養(yǎng)，觀察胰島素（INS）、糖皮質激素（DEX）、棕櫚酸（PA）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和噻唑烷二酮（TZD）對腹內脂肪組織RBP4mRNA表達調控的影響。
　　 結果：
　　 1.RBP4 mRNA在腹內、皮下脂肪組織的表達差異：在NW-NGT者，二者差異無統(tǒng)計學意義（0.75±0.27比1.054±0.15，P>0.05）；

3、在OB或T2DM者，腹內脂肪的表達量顯著高于皮下脂肪（分別為2.10±1.84比0.99±0.14，1.54±0.46比1.13±0.07，P<0.01或P<0.05）。
　　 2.RBP4 mRNA在正常、肥胖、T2DM者之間的表達差異：OB和T2DM者腹內脂肪RBP4 mRNA的表達量顯著高于NW-NGT者（分別為2.10±1.84比0.75±0.28，P<0.01和1.54±0.46比0.75±0.28，P<0.05），而

4、OB和T2DM者之間則無明顯差異（2.10±1.84比1.54±0.46，P>0.05）；三組人群皮下脂肪RBP4 mRNA的表達無統(tǒng)計學意義（1.05±0.15比O.99±0.14比1.13±0.07，P>0.05）。
　　 3.胰島素、地塞米松、吡咯列酮、棕櫚酸能顯著上調RBP4 mRNA表達，與空白對照組相比，分別上升了2.13倍、0.84倍、2.04倍、4.88倍，差異有統(tǒng)計學意義；TNF-α能顯著下調RBP4 mRNA

5、表達，較空白對照組下降了38％，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 小結：
　　 1.RBP4在腹內脂肪和皮下脂肪組織均有表達，二者在正常人群中無明顯差異。
　　 2.肥胖和2型糖尿病患者腹內脂肪組織RBP4 mRNA的表達量顯著高于皮下脂肪組織。
　　 3.脂肪組織RBP4 mRN_A的表達受胰島素、地塞米松等多種參與糖脂代謝及胰島素抵抗因素的調控。
　　 4.肥胖患者腹內脂肪組織RBP4的高表達可能是血

6、清RBP4升高的主要來源。
　　 第二部分：PPAR-γ激動劑對高脂喂養(yǎng)SD大鼠RBP4表達的影響及機制。
　　 目的：通過觀察PPAR-γ激動劑吡咯列酮對高脂喂養(yǎng)SD大鼠RBP4水平的影響，探討PPAR-γ激動劑對RBP4基因表達的調控機制。
　　 方法：24只雄性SD大鼠隨機分為2組，普通飼料喂養(yǎng)組（NC組，n=8）和高脂飼料喂養(yǎng)（F組，n=16），8周后，將高脂組隨機分為2組：高脂對照組（FC組，n=8）、

7、高脂吡咯列酮干預組（F+Pio組，n=8），并分別予以生理鹽水、吡咯列酮灌胃，共4周。干預前后均進行OGTT及ITT實驗，取血測血糖、血脂各項指標及血清RBP4水平，并評價胰島功能。實驗結束后，取附睪脂肪、肝臟，稱重，計算肝體比、脂體比。RT-PCR及Western-blot法檢測附睪脂肪、肝臟組織RBP4 mRNA和蛋白表達水平。
　　 結果：喂養(yǎng)8周后，F組大鼠空腹血糖和胰島素升高，血脂紊亂，糖耐量和胰島素耐量減低，脂體比增

8、加，血清RBP4水平顯著升高（58.3±12.7vs26.8±7.3，p<0.01）；吡咯列酮干預4周后，脂體比、肝體比均明顯降低（P<0.01），血糖、血脂、肝功能顯著改善（P<0.05或P<0.01），空腹胰島素水平降低、胰島素耐量明顯好轉（均P<0.01）。血清RBP4水平較FC組明顯降低（30.3±13.9 vs78.3±14.6，p<0.01）。此外，高脂喂養(yǎng)后，附睪脂肪組織RBP4 mRNA及蛋白和PPAR-γ mRNA的表

9、達量顯著升高（均P<0.01），吡咯列酮組干預后附睪脂肪組織RBP4 mRNA及蛋白水平明顯下降（P<0.01），PPAR-γ mRNA的表達量繼續(xù)上升，并明顯高于FC組（P<0.01）。三處理組間肝臟組織RBP4及PPAR-γ的表達量無明顯差異。相關性分析發(fā)現，血清RBP4與附睪脂肪RBP4 mRNA及蛋白的表達量正相關，相關系數分別為0.594和0.648（均p<0.01），并與血糖（ALJCBG）、血脂各參數（TG、TC、LDL-

10、C）、胰島功能各項指標（FINS、AUCITT）、腹內脂肪的重量（腎周脂肪、附睪脂肪）及脂體比正相關。血清RBP4與肝臟組織RBP4無明顯相關性。試驗中亦未發(fā)現RBP4與PPAR-7相關。
　　 小結：
　　 5.制作了高脂喂養(yǎng)誘導的胰島素抵抗大鼠模型。
　　 6.高脂飲食可以誘發(fā)胰島素抵抗，并導致血清及脂肪組織RBP4水平升高，二者呈顯著正相關。
　　 7.吡咯列酮選擇性激活脂肪組織PPAR-γ基因表達

11、，發(fā)揮降低血糖、改善胰島素抵抗作用，同時顯著降低RBP4水平。
　　 結論：
　　 1.RBP4在腹內脂肪和皮下脂肪組織均有表達，二者在正常人群中無明顯差異。
　　 2.肥胖和2型糖尿病患者腹內脂肪組織RBP4 mRNA的表達量顯著高于皮下脂肪組織。
　　 3.脂肪組織RBP4 mRNA的表達受胰島素、地塞米松等多種參與糖脂代謝及胰島素抵抗因素的調控。
　　 4.肥胖患者腹內脂肪組織RBP4的高表