寧夏地區(qū)嗜麥芽窄食單胞菌臨床耐藥分布及氟喹諾酮耐藥基因研究.pdf

1、目的：對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌感染的臨床分布、抗菌藥物的耐藥狀況及耐藥基因進(jìn)行研究，為臨床治療提供有力依據(jù)；用脈沖場(chǎng)凝膠電泳技術(shù)（PFGE）對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌進(jìn)行同源性分析，探討該菌的醫(yī)院感染特征。
　　方法：收集2010—2012年三年寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院臨床常規(guī)檢出的嗜麥芽窄食單胞菌，采用全自動(dòng)微生物鑒定儀對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定，并用K-B瓊脂紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)；篩選2012年全年114株嗜麥芽窄食單胞菌，采用瓊脂二倍稀釋法測(cè)定7種抗菌藥

2、物對(duì)細(xì)菌的最低抑菌濃度(MIC)值，同批測(cè)定諾氟沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星加入外排泵抑制劑（利血平）后抗菌藥物的 MIC值的變化情況；應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)嗜麥芽窄食單胞菌中氟喹諾酮類(lèi)耐藥基因的存在情況；應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR法檢測(cè)外排泵smeD和smeF基因mRNA的相對(duì)表達(dá)水平；測(cè)序后進(jìn)行Blast比對(duì)序列；應(yīng)用脈沖場(chǎng)凝膠電泳進(jìn)行同源性分析。
　　結(jié)果：2010—2012年三年共分離得到嗜麥芽窄食單胞菌426株，占非發(fā)

3、酵菌的10.1％（426/4225）；114株嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)諾氟沙星、環(huán)丙沙星和氧氟沙星的耐藥率分別為32.4%、21.9%和13.2%。加入泵抑制劑后共篩選得到19株外排泵陽(yáng)性株。篩選得到的2株外排泵陽(yáng)性的耐藥株均有 smeD和smeF的高表達(dá)。114株嗜麥芽窄食單胞菌中g(shù)yrA,parC,smeD,smeE,smeF基因的陽(yáng)性率均為100%，smqnr基因的陽(yáng)性率為25.4%。5株菌的gyrA基因有3株菌的第51位氨基酸發(fā)生了由

4、谷氨酸突變?yōu)橘嚢彼幔?株菌的parC基因中有4株菌的第37位的氨基酸發(fā)生了由甘氨酸突變?yōu)榫彼帷０l(fā)生gyrA或parC基因突變的耐藥與敏感組之間的差異無(wú)顯著性（P>0.05）。對(duì)29株嗜麥芽窄食單胞菌進(jìn)行PFGE同源性分析，呈現(xiàn)散在分布。
　　結(jié)論：1.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院的嗜麥芽窄食單胞菌主要分布在ICU、呼吸科、神經(jīng)外科以及兒科，以痰、咽拭子、導(dǎo)管和排泄物中檢出率最高。
　　2.在嗜麥芽窄食單胞菌中smqnr基因介導(dǎo)氟喹諾