腰痹舒對兔椎間盤退變髓核組織TNF-α、MMP-1及TIMP-1表達的影響.pdf

1、研究目的：
　　觀察腰痹舒湯劑對退變椎間盤髓核組織TNF-α、MMP-1及TIMP-1表達的影響，揭示腰痹舒湯劑治療椎間盤退變是否通過調(diào)控TNF-α、MMP-1及TIMP-1的含量來實現(xiàn)，為明確中藥腰痹舒作用機理提供依據(jù)。
　　材料和方法：
　　45只成年新西蘭大白兔隨機分為A（腰痹舒干預(yù)組）、B（對照組）、C（空白組）三組，每組15只，A、B組行造模處理，用注射器扎破腰4~6椎間盤并向內(nèi)注射生理鹽水0.2ml， C組

2、行假手術(shù)處理。A組動物術(shù)后第8天開始給腰痹舒方劑，10ml/kg/日灌胃，至分批處死；B、 C組動物復(fù)合飼料喂養(yǎng)，自由飲水，至分批處死。分別于造模后第2周，4周，8周，3個周期分批處死實驗動物獲取標(biāo)本（處死前行腰椎X線攝片影像學(xué)觀察），每組每次隨機處死兔5只，將造模腰椎間盤組織取下，行大體形態(tài)學(xué)觀察、組織學(xué)觀察、MMP-1、TIMP-1免疫組化檢測、TNF-α酶聯(lián)免疫檢測。
　　結(jié)果：
　　1、影像學(xué)觀察結(jié)果：
　　腰

3、痹舒干預(yù)組及對照組各時期造模椎體X線影像示椎間隙變窄，椎體邊緣密度影增高，有骨贅形成；腰痹舒干預(yù)組各時期造模椎體椎間隙狹窄程度、椎體邊緣骨贅形成程度較對照組輕；空白組各椎體及椎間隙未見明顯異常。
　　2、形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果：
　　腰痹舒干預(yù)組造模椎間盤變窄，周圍少量骨贅形成，隨觀察周期的延長，未見明顯加重；對照組造模椎間盤變窄，初期椎體周圍少量骨贅形成，隨觀察周期的延長，造模椎間盤逐漸硬化，周圍大量骨贅形成；空白組椎間盤及椎體未

4、見異常改變。
　　3、組織學(xué)觀察結(jié)果：
　　空白組：光鏡下椎間盤形態(tài)規(guī)則，纖維環(huán)排列規(guī)整，髓核明顯。
　　腰痹舒干預(yù)組：術(shù)后2周纖維層寬厚，排列較規(guī)整，髓核存在；術(shù)后4周纖維環(huán)排列欠規(guī)整，髓核存在，椎間盤后緣出現(xiàn)透明軟骨。術(shù)后8周纖維環(huán)排列錯亂，髓核減少，部分髓核被類骨質(zhì)取代，椎間盤后緣可見透明軟骨。
　　對照組：術(shù)后2周纖維環(huán)排列欠規(guī)整，髓核減少，椎間盤后緣開始出透明軟骨；術(shù)后4周可見纖維環(huán)破壞，髓核組織明顯減

5、少，類骨質(zhì)大量增生；術(shù)后8周髓核基本消失，被增生的類骨質(zhì)、骨質(zhì)取代。
　　4、免疫組化結(jié)果：
　　空白組各周期MMP-1圖像灰度值高，表明MMP-1表達不明顯。各周期TIMP-1圖像灰度值高，表明TIMP-1表達不明顯。
　　腰痹舒干預(yù)組2周MMP-1圖像灰度值高，表明MMP-1表達不明顯，隨著周期延長，4、8周MMP-1圖像灰度增低，表明MMP-1表達增加，與空白組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.05）；各周期TIMP-1

6、圖像灰度值高，表明TIMP-1表達不明顯。
　　對照組第2周MMP-1、TIMP-1圖像灰度值高，MMP-1、TIMP-1表達不明顯，隨著周期延長，4、8周MMP-1圖像灰度值低，MMP-1高度表達，與空白相比有統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.05），與腰痹舒干預(yù)組相比也有統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.05）；各周期 TIMP-1圖像灰度值較低，表明存在TIMP-1表達，與空白組及腰痹舒干預(yù)組相比均存在統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.05）。
　　5、酶聯(lián)免

7、疫結(jié)果：
　　術(shù)后第8周對照組中TNF-α表達較腰痹舒干預(yù)組及空白組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），腰痹舒干預(yù)組中TNF-α表達比空白組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）
　　結(jié)論：
　　1.腰痹舒可通過對兔退變腰椎間盤中致炎因子TNF-α的抑制作用來減輕腰椎間盤的退行性改變。
　　2.腰痹舒可通過對兔退變椎間盤內(nèi)MMP-1表達下調(diào)作用來減輕腰椎間盤退行性改變。
　　3. TIMP-1為MMP