血管生成素-1通過調(diào)節(jié)PI3K-Akt信號途徑抑制H-,2-O-,2-誘導(dǎo)心肌細胞凋亡的研究.pdf

1、目的：觀察血管生成素-1(Angiopoietin-1，Ang-1)對過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)小鼠心肌細胞凋亡的影響及其與磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidyl inositol3 kinase，PI3K)/絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase，Akt)信號通路活化的關(guān)系。 方法：取體外正常培養(yǎng)的新生小鼠心肌細胞，分為正常培養(yǎng)組即對照組、H2O2誘導(dǎo)凋亡組即實驗組、實驗+Ang-1(200ng

2、/mL)組、實驗+Ang-1(200ng/mL)+LY294002(50μmoL/L)組，采用Hoechst-33342染色法觀察心肌細胞凋亡形態(tài)學特征，流式細胞儀檢測各個實驗組心肌細胞凋亡率；Western-blotting檢測信號蛋白p-AKT、AKT、Active-caspase3的表達。 結(jié)果：采用Hoechst-33342染色法可以顯示凋亡的心肌細胞呈現(xiàn)細胞核聚集、皺縮、碎裂等典型的凋亡形態(tài)學特征；血管生成素-1可以通

3、過調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號途徑抑制H2O2誘導(dǎo)心肌細胞凋亡；與實驗組相比對照組、實驗+Ang-1(200ng/mL)組的細胞凋亡率均降低(2.13±0.61％ vs48.16±1.37％ p<0.01；31.20±2.01％ vs48.16+1.37％ p<0.01)，而實驗+Ang-1(200ng/mL)+LY294002(50μmoL/L)組的細胞凋亡率和實驗組沒有統(tǒng)計學差異(47.42±2.02％ vs48.16±1.37％ p>