蛛網(wǎng)膜下腔出血的抗炎治療：調節(jié)性T細胞過繼轉輸.pdf

1、目的：
　　1、建立大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型，靜脈給予外源性CD4+CD25+調節(jié)性T細胞，探討腦組織炎性細胞浸潤的變化。
　　2、觀察CD4+CD25+調節(jié)性T細胞靜脈輸注治療后蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠模型腦組織中TLR4、NF-κB，以及血漿中相關炎性因子表達的變化，探討CD4+CD25+調節(jié)性T細胞對蛛網(wǎng)膜下腔出血后炎癥反應的抑制作用。
　　方法：
　　1、用免疫磁珠兩步法，從大鼠的脾臟及淋巴結中分離、獲取高純度的

2、調節(jié)性T細胞。枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型。隨機將健康成年雄性wister大鼠隨機分為正常組、假手術組、SAH組，SAH組分為靜脈PBS輸注組(PBS組)、脾細胞(spleencells，SP)輸注組和Treg輸注組。于術后2天斷頭取腦，免疫組化法檢測腦組織中的炎性細胞浸潤情況。
　　2、選用成年健康的雄性wister大鼠，枕大池二次注血法制作大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型。隨機將動物分為正常組、假手術組、蛛網(wǎng)膜下腔出血組（SAH組

3、），蛛網(wǎng)膜下腔出血組分為靜脈PBS輸注組、脾細胞(spleencells，SP)輸注組和Treg輸注組。術后第2天斷頭取腦，由股靜脈留取靜脈血，免疫組化法檢測腦組織中TLR4的表達，westernbolt法檢測腦組織中TLR4、NF-κB蛋白水平，ELISA法檢測外周血中炎性細胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平的變化。
　　結果：
　　與假手術組相比，SAH后腦組織中性粒細胞浸潤明顯增多，TLR4表達也有明顯升高。同

4、時，SAH組NF-κB表達水平顯著增高。血漿中IL-1β、TNF-α、 IL-6表達顯著增高。與PBS治療組和SP治療組相比，Treg治療組腦組織中TLR4，NF-κB水平顯著降低，血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6表達也降低(P＜0.05)。
　　結論：
　　SAH早期出現(xiàn)腦血管痙攣及腦損傷后，炎性因子、NF-κB的表達與TLR4有關。TLR4在腦室周圍的血管叢中表達較多，在小膠質、星形膠質細胞，少量分布于腦血管內的內