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文檔簡介
1、目的:
研究人臍帶間充質干細胞(Human Umbilical Cord Wharton’s Jelly-derivedMesenchymal Stem Cells,huMSCs )及其誘導分化為生殖樣細胞后的免疫學特性,為進一步研究huMSCs 移植特性提供實驗依據(jù)。
方法:
分離培養(yǎng)huMSCs,在生殖細胞培養(yǎng)條件下定向誘導其分化,倒置相差顯微鏡下觀察誘導后細胞形態(tài)。采用FACScan 流式
2、細胞儀檢測誘導前后huMSCs 表面抗原CD40、CD40L、CD80、CD86。半定量RT-PCR檢測誘導前后huMSCs的 HLA-I、HLA-DR基因表達水平的變化。用CCK-8 法檢測誘導前后的不同數(shù)量級huMSCs 對混合淋巴細胞反應體系中經植物血凝素(PHA )激活的同種異體外周血淋巴細胞(PBMC)增殖的影響。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA )檢測誘導前后huMSCs 對經PHA 活化的T 細胞分泌IFN-γ的影響。
3、r> 結果:
huMSCs 在生殖細胞培養(yǎng)條件下能分化為生殖樣細胞,誘導前后的huMSCs 均表達HLA-I,不表達CD40、CD40L、CD80、CD86和HLA-DR。huMSCs 能抑制經PHA 激活的T 淋巴細胞增殖,并抑制T 淋巴細胞IFN-γ的分泌,但huMSCs 源生殖樣細胞并不能抑制經PHA 激活的T 淋巴細胞增殖及IFN-γ的分泌。
結論:
huMSCs 在體外生殖細胞培
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