靈芝總三萜對鵝膏中毒小鼠所致肝損傷的保護作用研究.pdf

1、蘑菇中毒主要是由鵝膏肽類毒素所引起，目前尚缺少有效的治療鵝膏中毒的藥物，前期研究表明靈芝具有很好的治療效果，為此本論文擬探討靈芝的有效成分——靈芝總三萜對鵝膏毒肽中毒小鼠所致肝損傷的保護作用及其抗氧化機理研究，實驗結果如下:
　　1、靈芝總三萜的提取及其純化:運用二氧化碳超臨界提取法進行粗提，靈芝子實體打粉，以95％乙醇作為夾帶劑，萃取條件:溫度40℃;壓力35MPa;耗時2.5小時;CO2流量為35g/min;夾帶劑和粉末的體積

2、/重量比為6∶1(mL/g)。超臨界萃取率為2.42％。再將超臨界提取物進行硅膠柱層析進一步分離，流動相為不同比例的氯仿、甲醇混合溶液。目的產物主要集中在前兩個洗脫比例的流動相，其中氯仿∶甲醇比例為98∶2組分所得產物重量為6.333g;氯仿∶甲醇比例為96∶4組分所得產物重量為6.912g。
　　2、靈芝總三萜對鵝膏毒肽中毒治療預實驗:分別設置正常對照組、鵝膏毒肽中毒組、高低劑量靈芝總三萜組、水飛薊賓組和純橄欖油組，以確定靈芝總

3、三萜對鵝膏毒肽中毒的治療效果。靈芝總三萜隨機選取高劑量(200mg/kg/day)和低劑量(50mg/kg/day)兩個組作為實驗組，總三萜溶于食用級橄欖油中。結果表明靈芝總三萜給藥組均表現(xiàn)出一定的藥效，而最佳劑量還需要接下來的實驗來確定。此外純油組的各項生化指標均于中毒組相比無明顯差異，故能排除掉橄欖油可能帶來的影響。
　　3、不同劑量靈芝總三萜對α-鵝膏毒肽中毒小鼠的肝損傷保護作用研究。設置正常組、鵝膏毒肽中毒組、純油組和不同

4、劑量純化靈芝總三萜處理組（劑量分別為25、50、100、200、400mg/kg/day,橄欖油溶解為懸濁液，灌胃處理）。結果說明靈芝總三萜對α-鵝膏毒肽所致肝損傷的保護效果在一定的范圍內呈現(xiàn)劑量的正相關性，并隨著劑量的增加（25mg/kg/day到200mg/kg/day），血清和肝勻漿中的各項指標更接近于正常組。當劑量達到100mg/kg/day和200mg/kg/day時，血清中轉氨酶活性(ALT、AST)和肝勻漿內各項指標(SO

5、D、CAT、MDA)均與中毒組相比改善最為明顯。
　　4、不同給藥時間靈芝總三萜對α-鵝膏毒肽中毒小鼠肝損傷保護作用研究。設置正常組、鵝膏中毒組和靈芝總三萜不同時間給藥組（依次在注射毒素后0h、1h、2h、3h、4h、5h給藥），靈芝總三萜灌胃劑量選擇200mg/kg/day。結果表明在中毒之后越早給藥，相應的治療效果越好，即血清中各項酶的指標和肝勻漿中各項生化指標越接近正常組的水平，尤以0小時組的效果最佳，這說明在生活中出現(xiàn)鵝膏

6、菌中毒后盡早送醫(yī)治療是至關重要的。
　　5、在α-鵝膏毒肽致死劑量下對正常組、中毒組、靈芝總三萜組和水飛薊賓組的小鼠存活情況進行統(tǒng)計分析，經(jīng)120小時觀察，正常組小鼠全部存活，中毒組死亡率卻高達96.67％，而靈芝總三萜給藥組和水飛薊賓對照組的死亡率則分別為46.67％和56.67％，實驗結果表明靈芝總三萜對鵝膏中毒有較好的解毒效果。
　　總之，靈芝總三萜對α-鵝膏毒肽中毒引起的肝損傷表現(xiàn)出有效的保護作用，且呈現(xiàn)出一定的劑量