兔蛛網膜下腔出血后腦組織微循環(huán)灌注與凋亡相關基因Bax、Bcl-2表達及微血管密度關系的研究.pdf

1、目的通過檢測兔實驗性蛛網膜下腔出血后腦組織微循環(huán)灌注、凋亡相關基因Bax、Bc卜2的表達、微血管密度的動態(tài)變化，探討腦組織微循環(huán)灌注與凋亡相關基因Bax、Bcl-2的表達及微血管密度之間的關系。材料與方法45只新西蘭大白兔隨機分為3組：A組(正常對照組，n=5)，B組(SAH組，n=20)，C組(假手術對照組，n=20)，B、C兩組動物再隨機分為第1d、3d、5d、7d，4個亞組，每組5只動物。首先制作兔枕大池二次注血或注生理鹽水模型，

2、接著分別于二次注血或注生理鹽水后，第1、3、5、7天行常規(guī)CT灌注掃描。A組動物CT灌注掃描結束后，B、C組動物于二次注血或注生理鹽水后第1、3、5、7天成像結束后，立即灌注取腦，標本送常規(guī)病理及電鏡觀察。最后應用免疫組織化學技術檢測SAH后不同時間Bcl-2、Bax和CD34的表達。結果SAH后動物進食量下降、神經功能障礙，基底動脈血管內皮細胞胞核染色質邊聚，內皮細胞間緊密連接增寬；平滑肌細胞空泡變；毛細血管管腔狹窄，血管周圍間質水腫

3、；神經膠質細胞水腫，線粒體空泡變。CBF于SAH后d1、d3、d5、d7均有所降低，以第d3下降明顯(與對照組及假手術組比較有顯著統(tǒng)計學意義，P<0．05)；CBV于SAH后dl略有升高，d3、d5、d7降致正常值以下，以d5下降最為明顯(與對照組及假手術組比較有顯著統(tǒng)計學意義，P<0．05)；MTT于SAH后dl有所延長，d3、d5、d7降致正常值以下，但與對照組及假手術組比較各組均無顯著統(tǒng)計學意義；Bcl-2蛋白表達于SAH后dl明

4、顯增強達到高峰，但隨后d3、d5、d7降低，與對照組及假手術組比較各組均有顯著統(tǒng)計學意義(P<0．05)；Bax表達于SAH后dl、d3逐漸升高達到高峰；在d5、d7逐漸降低，但其表達仍維持在較高水平，與對照組及假手術組比較各組均有顯著統(tǒng)計學意義(P<0．05)；CD34+表達毛細血管數目于SAH后d1、d3、d5逐漸增多，以d5CD34+表達最為明顯，d7較d5有所降低，但表達仍維持在較高水平，與對照組及假手術組比較各組均有顯著統(tǒng)計學

5、意義(P<0．05)；SAH后CBF、CBV、MTT變化與Bax、Bcl-2、CD34變化無明顯相關性；CBF變化與Bcl-2／Bax變化正相關(r=0．356，P<0．05)。結論1．枕大池二次注血法制作的兔SAH模型，動物死亡率低，基底動脈、毛細血管、神經膠質細胞可產生明顯的病理改變，是一種穩(wěn)定易得的理想模型；2．SAH后CBF變化與Bcl-2／Bax變化正相關，CBF可能作為的監(jiān)測SAH后缺血性腦損傷程度的有效指標；3．兔實驗性蛛