月腺大戟抗淋巴細胞性白血病機理的研究.pdf

1、[目的]初步探討中藥月腺大戟的毒性及對淋巴性白血病的作用機理，為開發(fā)治療白血病的天然藥物，為臨床應用月腺大戟治療白血病提供理論基礎。 [方法]本研究首先獲取純正的月腺大戟原植物，經鑒定后，分別用蒸餾水和95％乙醇將其進行粗提，用水提物進行一系列實驗。首先進行毒理學方面的實驗，對月腺大戟的細胞毒性與傳統(tǒng)的治療藥物環(huán)磷酰胺進行了對比并進行了致突變研究：對不同給藥組P388淋巴細胞白血病患鼠肝、腎中MDA的含量進行了比較，進行了月腺大

2、戟水浸液的最大耐受實驗(MTD)、微核實驗和精子畸變實驗，并對MTD實驗小鼠各重要臟器進行病理檢查。然后，在初步了解其毒性的基礎上以P388淋巴細胞性白血病小鼠為動物模型，從延長白血病小鼠生命延長率、遏制細胞惡性增殖及病理改變、增強機體抗脂質過氧化系統(tǒng)活性、機體免疫能力、誘導白血病細胞凋亡等角度對月腺大戟的抗白血病的作用機理進行了較系統(tǒng)的研究：比較了不同給藥組小鼠的生命延長率，計數了小鼠外周血白細胞數及腹水瘤細胞數，對外周血淋巴細胞進行

3、形態(tài)學觀察并計數腫瘤細胞凋亡率，通過計算T淋巴細胞轉換率反映機體特異性免疫力，對肝、腎中SOD和GSH-PX活力進行了測定，免疫組化法對外周血淋巴細胞中bcl-2/bax相關凋亡基因蛋白的表達進行了檢測。 [結果]結果表明月腺大戟能顯著抑制由于P388白血病細胞攻擊引起的DBA小鼠外周血中白細胞和腹水瘤細胞的惡性增殖、提高患鼠的生命延長率，緩解受白血病細胞攻擊引起的瘤細胞浸潤、并恢復肝中超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶的活性，

4、說明月腺大戟對抑制白血病的發(fā)展，提高機體抗脂質過氧化能力有較強的作用。 本研究還發(fā)現(xiàn)，月腺大戟水提物對淋巴細胞白血病小鼠bcl-2和bax凋亡相關基因蛋白表達具有不同程度的影響，不同劑量的藥物對腫瘤細胞中凋亡基因的表達存在著差異，提示月腺大戟可能是通過作用于細胞凋亡相關基因影響其表達，最終誘導白血病細胞凋亡來抑制白血病，因而誘導細胞凋亡可能是月腺大戟抑制白血病的重要途徑之一。 月腺大戟的毒性實驗發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，在使用

5、劑量(2.7g/kg)下對機體無明顯毒性，微核實驗與精子畸變實驗均未發(fā)現(xiàn)有明顯致突變與致畸作用。月腺大戟的最大耐受量(MTD)＞288g/kg。與對照藥物環(huán)磷酰胺相比，即使月腺大戟的劑量增至77g/kg，各項毒性指標也遠遠低于常規(guī)用藥劑量的環(huán)磷酰胺。但同時，月腺大戟高劑量組(288g/kg)在腎臟和心臟等出現(xiàn)了不同程度的病理改變，而對照組并未發(fā)現(xiàn)，有可能是其毒性作用引起，有待進一步研究。但總體上月腺大戟是一種安全性較好的低毒藥物。