創(chuàng)復(fù)康噴劑抗感染及對(duì)大鼠創(chuàng)傷感染模型的IL-1β和TNF-a影響研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察創(chuàng)復(fù)康噴劑在體外對(duì)常見(jiàn)創(chuàng)傷感染細(xì)菌的抑殺作用，對(duì)小鼠腹腔吞噬細(xì)胞的吞噬功能的促進(jìn)作用，為臨床應(yīng)用于抗感染提供理論支持；對(duì)制備SD大鼠背部全層皮膚切除感染模型后創(chuàng)傷修復(fù)中的抗炎因子白介素1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)表達(dá)的影響，旨在從分子生物學(xué)角度探討創(chuàng)復(fù)康噴劑對(duì)創(chuàng)傷修復(fù)作用的機(jī)制。
　　 方法：(1)本實(shí)驗(yàn)以臨床創(chuàng)傷感染常見(jiàn)細(xì)菌為受試菌，采用打孔法，牛津杯法，連續(xù)倍比稀釋法，觀察創(chuàng)復(fù)康噴劑的最低抑

2、菌濃度和最低殺菌濃度。
　　 (2)創(chuàng)復(fù)康噴劑對(duì)吞噬細(xì)胞的影響實(shí)驗(yàn)將健康昆明小鼠按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為2大組，每大組中分實(shí)驗(yàn)組，陽(yáng)性對(duì)照組，陰性對(duì)照組，每組6只。于每只小鼠腹腔按組別分別注射創(chuàng)復(fù)康噴劑、0.1％雷大諾爾、生理鹽水各1ml，連續(xù)3天，在第4天按大組分別注射1ml雞紅細(xì)胞懸液和酵母菌，30分鐘后處死取腹腔液涂片，經(jīng)瑞姬氏染色后在顯微鏡下讀片，統(tǒng)計(jì)吞噬率和吞噬指數(shù).
　　 (3)創(chuàng)復(fù)康噴劑對(duì)背部全層皮膚切除感染模

3、型大鼠TNF-α和IL-1β影響的實(shí)驗(yàn)將30只SD大鼠按隨機(jī)化原則隨機(jī)分為兩大組，每大組15只，再將每個(gè)大組分空白組，模型組，對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組。
　　 于造模型成功后12小時(shí)分組外噴創(chuàng)復(fù)康噴劑、復(fù)方黃柏液、生理鹽水，生理鹽水5ml/次，每日2次，于168小時(shí)后選取一組，切取未愈合創(chuàng)面邊緣0.2cm的新生肉芽組織和皮膚，每只大鼠取約0.5g，超聲波粉碎后，制成組織勻漿，保存于-20℃冰箱中，待第二次288小時(shí)后取另一組標(biāo)本；將制備好

4、的10％勻漿離心留上清液，采用放射免疫檢測(cè)TNF-α和IL-Lβ濃度。
　　 結(jié)果：(1)本方對(duì)金葡菌，銅綠假單胞菌和乙型溶血性鏈球菌作用較強(qiáng)，與對(duì)照組比較總體無(wú)顯著性差異；對(duì)銅綠假單胞菌怍用與青青霉素藥敏紙片比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為31.5mg/ml，MBC為62.5mg/ml，對(duì)大腸埃希菌的MIC為62.5mg/ml，MBC為62.5mg/ml，對(duì)銅綠假單胞菌的MIC為31.5mg/ml，MBC為125m

5、g/ml,對(duì)乙型溶血性鏈球菌的MIC為15.62mg/ml.MBC為31.5mg/ml。
　　 (2)創(chuàng)復(fù)康噴劑能夠顯著影響小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)雞紅細(xì)胞和酵母菌的吞噬功能，與雷夫諾爾相比較P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與空白對(duì)照組比較P＜0.01，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；由吞噬指數(shù)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果可見(jiàn)，創(chuàng)復(fù)康噴劑能夠使巨噬細(xì)胞同時(shí)吞噬多個(gè)雞紅細(xì)胞或酵母菌.與霄夫諾爾組相比較P＜0.05.兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與空白對(duì)照組比較P＜0.01，創(chuàng)復(fù)康噴

6、劑能夠促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)異物和細(xì)菌的吞噬能力。
　　 (3)創(chuàng)復(fù)康噴劑對(duì)炎癥介質(zhì)TNF-、IL-1β的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組與空白組分別比較，TNF-α、IL-1β的濃度含量明顯增多，在α=0.05下方差分析有顯著性差異；實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組與模型組比較，經(jīng)方差分析，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型組與空白組比較，P＜0.05，尚不能認(rèn)為兩樣本無(wú)差異，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較TNF-α、IL-1β的濃度，P＞0.05，方差分析尚不

7、能認(rèn)為兩樣本間有顯著性差異。表明運(yùn)用創(chuàng)復(fù)康噴劑和復(fù)方黃柏液可以增加皮膚創(chuàng)傷感染過(guò)程中炎癥因子的濃度，具有調(diào)節(jié)的作用，能夠促進(jìn)炎癥因子在創(chuàng)傷局部的表達(dá)。
　　 經(jīng)多樣本間的方差分析可知，TNF-α和IL-1β濃度具有同向性，變化相互影響。在第7天與12天具有相似性，兩次檢測(cè)同組的不同時(shí)間無(wú)顯著性差異，統(tǒng)計(jì)分析無(wú)意義，如：模型組在第7大和12大時(shí)腫瘤壞死因子濃度無(wú)明顯變化，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明創(chuàng)復(fù)康噴劑與復(fù)方黃柏液能夠刺激局部創(chuàng)傷組織