抗氧化劑吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）對卵巢癌細胞HO8910增殖、凋亡的影響及機制的研究.pdf

1、目的： 研究抗氧化劑吡咯烷二硫代氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)體外對卵巢癌HO8910細胞增殖及凋亡的影響，了解PDTC體外抗卵巢癌作用及其機制，為PDTC在卵巢癌治療提供重要的實驗室基礎(chǔ)和理論依據(jù)。 方法： 1.采用四甲基偶氮哇藍(MTT)法，分別檢測不同濃度PDTC，DDP和聯(lián)合應用PDTC與DDP對H08910細胞生長抑制的影響。 2.采用吖啶橙和溴化乙

2、啶雙熒光染色法觀察凋亡細胞。 3.采用流式細胞儀檢測不同濃度PDTC作用HO8910后的細胞凋亡率。 4.免疫組化法測定PDTC作用后卵巢癌HO8910細胞IKK β、NF-кB、XIAP、Bcl-2以及caspase-3表達的影響。 結(jié)果： 1.PDTC濃度為25μM、50μM、100μM和200μM時，作用12、24、36h均明顯抑制HO8910細胞的增殖，與對照組比較差異有顯著性(P<0.01)，并

3、具有時間、劑量依賴性。12、24、36h，HO8910的半數(shù)抑制率IC<,50>所需的PDTC濃度分別為393.2836、340.9378、275.7231μ mol/L。 2.順鉑聯(lián)合應用PDTC時能顯著提高順鉑殺傷卵巢癌細胞作用。單用DDP 0.75μ g/ml、1.5 μg/ml、3.0μg/ml和6.0 μg/ml作用24h時，細胞生長抑制率僅為9.22％、19.9％、37.39％和66.72％，25μM PDT

4、C預處理1h后加入DDP使作用終濃度達到0.75μg/ml、1.5μg/ml、3.0μg/ml和6.0μg/ml作用24h后其細胞生長抑制率則為18.61％、37.23％、65.78％和88.03％，聯(lián)合應用PDTC和DDP與單用DDP對卵巢癌細胞的生長抑制率相比，差異有顯著性(P<0.05)。 3.將PDTC與細胞共同作用后，經(jīng)吖啶橙/溴化乙啶雙熒光染色觀察可見中晚期凋亡細胞呈橘紅色或紅色，染色質(zhì)凝集，染色均勻，細胞核變小，可

5、見凋亡小體。 4.采用流式細胞儀檢測不同濃度PDTC誘導凋亡作用，當PDTC濃度為25μM、50μM、100μM時，作用HO8910 24h小時后，細胞凋亡率分別為4.38％、8.13％、17.16％，與對照組比較及三組之間比較差異有顯著性(P<0.01)。 5.免疫組化法顯示PDTC濃度為10，100μM作用24h小時后細胞漿中NF-кB、IKK13表達無顯著性變化，caspase-3增加，Bcl-2、XIAP及細胞核

6、中表達NF-кB下調(diào)，與對照組比較差異有顯著性(P<0.01)。 結(jié)論： 1.PDTC能有效抑制卵巢癌HO8910細胞增殖。 2.PDTC能誘導卵巢癌HO8910細胞凋亡，其治療腫瘤機制可能是通過抑制NF-кB活性并下調(diào)XIAP，Bcl-2表達，促進caspase-3活化而抑制腫瘤生長和誘導腫瘤細胞凋亡。 3.抗氧化劑PDTC能夠增強順鉑化療作用，提高療效。 4.抗氧化劑PDTC有望為卵巢癌輔助治