基于吖啶酯化學發(fā)光體系的毛細管電泳—化學發(fā)光在線聯(lián)用技術在藥物分析中的應用.pdf

1、隨著醫(yī)療事業(yè)的不斷發(fā)展，衛(wèi)生醫(yī)療條件的不斷改善，人們在日常用藥中也更加注重安全有效。因此，治療藥物濃度的監(jiān)測工作在保障人們用藥安全中也顯得越來越重要。由于生物樣品種類繁多，成分復雜等特點，對治療藥物監(jiān)測手段的發(fā)展、更新不斷提出新的挑戰(zhàn)。因此，建立使用方便快捷、操作簡單、靈敏度高、選擇性強的分析方法是目前體內(nèi)藥物分析研究的重要內(nèi)容。毛細管電泳(capillary elelctrophoresis，CE)分離技術具有分離時間短、分離效率高、

2、樣品消耗少等優(yōu)點，已成為近年來藥物分析最活躍的研究方向之一。為適應分析技術的發(fā)展要求，CE已經(jīng)開拓了不同的分離模式，從而能滿足對不同性質(zhì)、種類樣品的分析檢測要求，這也使得其在檢測生物體液中藥物及藥物代謝物等方面得到了廣泛應用。但由于CE分析量都在極微量水平，這就決定了其搭載的檢測技術必須具備足夠的靈敏度才能達到生物樣品的檢測要求。雖然激光誘導熒光檢測器(laser induced fluorescence detector, LIF)、

3、質(zhì)譜檢測器(mass spectrometry detector, MS)等檢測手段具備極高的檢測靈敏度，但其昂貴的儀器成本、復雜的檢測程序極大的限制了它們的應用?；瘜W發(fā)光(chemiluminescence，CL)檢測技術是在暗背景條件下對光信號搜集檢測，是一種在不需要外加光源的情況下即可實現(xiàn)檢測的分析手段，不僅儀器簡單廉價、易操作，而且能有效避免了光源的不穩(wěn)定以及瑞利散射和拉曼散射引起的背景噪音，使得其具有極高的檢測靈敏度，在一定程

4、度上甚至可以與MS、LIF等檢測技術相媲美。因此，CE與CL技術的結合是一種極為理想的分離分析手段，在醫(yī)藥分析領域，特別是在藥代動力學及相關領域具有極高的應用潛力。
　　本論文主要基于CE和CL各自的優(yōu)點，以吖啶酯作為柱前CL衍生試劑，建立了CE-CL的在線聯(lián)用技術用于同時檢測多巴胺(dopamine，DA)和西布特羅(cimbuterol，CM)。具體研究工作簡述如下:
　　以吖啶酯衍生物2'，6'-二甲基-4'-（N-琥

5、珀酰亞胺基）苯基-10-甲基吖啶-9-羧酸-1-丙磺酸內(nèi)(2',6'-dimethyl-4'-(N-succinimidyloxycarbonyl)phenyl-10-methyl-acridinium-9-carboxylate-1-propanesulfonate inner salt，AE)作為柱前CL衍生試劑，建立了一種簡單快速的CE-CL方法，實現(xiàn)了DA及CM的同時高靈敏度檢測。實驗中詳細考察了影響毛細管分離效率、CL信號強度

6、的因素以及氧化劑、共反應劑混合模式對系統(tǒng)分析性能的影響。在最優(yōu)條件下，DA與CM的濃度分別在5.0-1500 ng/mL及2.0-1000 ng/mL范圍內(nèi)與增強的CL強度呈良好的線性關系，檢測限(S/N=3)分別為2.0 ng/mL和0.50 ng/mL。用本方法對人尿液中的DA進行了檢測，并以酶聯(lián)免疫分析(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)試劑盒法作為參照實驗，兩種方法所得結果一致。尿