血管抑素對肺癌生物學行為的影響及抑制腫瘤血管形成分子機制的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文血管抑素對肺癌生物學行為的影響及抑制腫瘤血管形成分子機制的研究姓名：張玲申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：楊向紅20080401與微血管密度的關系，明確其在肺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及其與臨床病理之間的關系。二、動物實驗：采用人肺癌A 5 4 9 細胞建立c 5 7 B L ／6 近交系小鼠移植瘤模型進行實驗，評價A n g i o s t a t i n 治療肺癌的有效性。4 8 只荷人肺癌

2、A 5 4 9 C 5 7 B L ／6 近交系小鼠( 皮下移植瘤) 分成4 組，分別皮下腫瘤內注射A n g i o s t a t i n ( 濃度分別為0 ．6 m g ／K g 、1 ．2m g ／K g 、2 ．4m g ／k g ) ，對照組注射等量生理鹽水。注射次數(shù)1 次／2 d ，治療1 4 天，觀察腫瘤重量的變化；并用常規(guī)病理方法和免疫組化S ．P 法檢測腫瘤組織中細胞的形態(tài)學改變和C D 3 4 、S u r v i

3、 v i n 和N F - KB 的表達，計數(shù)微血管密度( M V D ) ，觀察A n g i o s t a t i n對人肺癌小鼠移植瘤新生血管形成的影響。三、體外培養(yǎng)：在體外研究中培養(yǎng)H U V E C s 和人肺癌A 5 4 9 細胞，應用M T T 比色法檢測血管抑素對H U V E C s 和A 5 4 9 細胞增殖活性的影響，臺盼蘭染色細胞計數(shù)法觀察血管抑素對人肺癌A 5 4 9 和血管內皮細胞生長的影響；建立腫瘤微血管

4、模型觀察血管抑素對內皮細胞管腔形成的影響；流式細胞術分析血管抑素對H U V E C s 細胞生長周期的影響。通過蛋白印記法檢測血管抑素對人血管內皮細胞作用的信號傳導途徑及其相關因子的表達，初步探討血管抑素抗新生血管形成作用的分子機制。結 果一、人體材料檢測結果：肺癌組織中A n g i o s t a t i nm R N A 表達量為5 ．5 6 士1 ．4 0 ，癌旁肺組織m R N A 表達量為7 ．8 5 + 1 ．7 4 ；

5、V E G F m R N A 表達量癌組織為1 2 ．4 3 ±1 ．5 8 ，癌旁組織為9 ．1 0 + 1 ．2 0 。組間比較差異顯著( P < o ．0 5 ) ；A n g i o s t a t i nm R N A 在I ．I I 期肺癌組織中表達量為9 ．4 1 ±2 ．2 9 ，在I I I ．Ⅳ期肺癌組織中表達量為5 ．2 6 - { - 2 ．3 9 ，后者表達水平較前者明顯降低，差異顯

6、著( P < O ．0 5 ) ；有淋巴結轉移組的A n g i o s t a t i nm R N A 表達水平低于無轉移組，差異顯著( P < 0 ．0 5 ) 。 V E G Fr n R N A 在I ．I I 期肺癌組織中表達為9 ．7 9±1 ．4 5 ，在I I I ．Ⅳ期肺癌組織中表達為1 6 ．8 3 ±2 ．3 8 ，后者表達水平明顯高于前者，差異極顯著( P ( 0 ．0 1 )