熱休克蛋白27調控LPS和IL-1β激活的胞內信號通路的研究.pdf

1、HSP27是小熱休克蛋白家族的一個重要成員,其生理功能主要包括保護細胞免受各種應激因素如自由基、高溫、缺血和毒性物質的損傷,促進蛋白質的正確折疊、組裝,參與細胞的增殖、分化及細胞凋亡的信號調節(jié)等。以往對HSP27的研究側重于對細胞凋亡的信號通路的調控,而在炎癥反應的信號通路方面研究較少。本課題對HSP27在炎癥反應中細菌脂多糖(LPS)和白介素1(IL-1β)誘發(fā)的信號通路中的作用進行了研究。
　　 在細菌感染引起的急性炎癥反應

2、中,LPS首先激活單核/巨噬細胞,通過活化特異性轉錄因子來合成和釋放大量促炎因子,其中TNF-α及IL-1β是公認的最為重要的兩種促炎因子,也是LPS引起的感染性疾病最直接和最關鍵的炎性介質。在先前的研究中發(fā)現(xiàn),HeLa細胞中HSP27可通過與IKK復合物的結合,負調控TNFα誘導的NF-κB的信號通路,而HSP27對IL-1β引起的NF-κB信號通路的調控方式目前了解得還不是很透徹。我們在過表達(“Overexpression”)或基

3、因敲低(“Knockdown”)HSP27的研究中發(fā)現(xiàn),一方面HSP27通過與TRAF6發(fā)生的蛋白間相互作用,促進了IL-1β引起的TRAF6的泛素化及IKK的激活；另一方面,IL-1β通過激活p38-MAPKAPK2-HSP27信號通路,引起HSP27的磷酸化,反過來促使HSP27與TRAF6解離,抑制了TRAF6-IKK信號轉導通路,最終導致IKK的活性下調。我們的實驗結果表明,不同于HSP27負調控TNFα激活的NF-κB信號通路

4、,HSP27以反饋調節(jié)的方式調節(jié)IL-1β激活的NF-κB信號通路。
　　 在此基礎上我們進一步研究了HSP27對單核巨噬細胞中LPS激活的IKK和MAPKs信號通路及iNOS和COX-2等炎癥相關蛋白的合成的影響。結果表明,在單核巨噬細胞中HSP27通過影響IKK的信號通路而不是MAPK信號通路,增加了LPS刺激的iNOS及COX-2的產生,進一步驗證了我們在HeLa細胞中得到的結論。
　　 綜上所述,本實驗主要研究了