NGI重組DNA疫苗對轉基因AD小鼠的治療作用.pdf

1、阿爾茨海默病(AD)是一種以進行性癡呆為主要臨床表現(xiàn)的神經退行性疾病，表現(xiàn)為記憶、智力、判斷能力、情感障礙和行為失常甚至發(fā)生意識模糊等，其顯著的病理學特征是腦內出現(xiàn)老年斑、神經元纖維纏結、和神經元和突觸丟失。β淀粉樣蛋白(Aβ)是引起AD發(fā)病最主要的因素，是導致AD特異性病理老年斑形成的主要原因，來源于淀粉樣前體蛋白(APP)經β分泌酶再經γ分泌酶進一步酶切形成的長度不等的片段。APP成分肽的釋放包括Aβ沉積主要發(fā)生在突觸，而新加坡分子

2、細胞生物學研究院發(fā)現(xiàn)APP只在中樞神經系統(tǒng)郎飛氏結簇集，在外周神經呈均勻分布，并提出了AD的郎飛氏結Aβ假說，認為郎飛氏結是Aβ的重要釋放位點。位于郎飛氏結區(qū)的Tenascins—R，少突膠質細胞髓鞘糖蛋白(OMgp)和位于結旁區(qū)的Nogo—A是與郎飛氏結相關的軸突生長抑制因子(NGIs)，而郎飛氏結是一群細胞粘附分子，細胞外基質分子和電壓門控鈉離子通道特異性簇集的軸突區(qū)域，結分子相互作用。OMgp與Na+通道相互作用，參與軸突生長抑制

3、，細胞增生調節(jié)，其LRR結構域是其神經生長抑制功能的主要功能區(qū)。Tenascin—R通過EGF—L結構域與Na+通道β亞基相互作用參與調節(jié)Na+通道，增強Na+通道的電流。Nogo—A其特異性氨基端(Nogo—N)，66個氨基酸細胞外域(Nogo—66)是其主要的抑制性結構域，介導軸突生長抑制和生長堆塌陷的作用。TAG1與APP相互作用以γ分泌酶依賴的方式促進APP細胞內域(AICD)的釋放。在郎飛氏結，APP與鈉離子通道形成復合體，相

4、互作用正向調節(jié)Na+內流。我們預測這些結分子與APP組成一個大的蛋白復合體，相互作用調節(jié)APP的功能，影響AICD的釋放和Aβ的產生。為了探索NGI對AD的治療作用，構建包含小鼠OMgp細胞外8 LRP重復序列，人Tenascin—R的EGF—L結構域，以及人Nogo—A的氨基端和66個氨基酸細胞外域cDNA的重組DNA疫苗；疫苗組APPswe/PS1dE9轉基因AD小鼠肌肉注射NGI重組DNA疫苗，空載體組(注射pcDNA4)和空白對

5、照組(不作任何處理)為對照組。Morris水迷宮檢測其行為學差別，結果顯示：4.5月齡轉基因小鼠在隱蔽平臺實驗中，訓練兩天后疫苗組小鼠潛伏期比對照組縮短30％(P<0.05)。探索實驗顯示3月齡疫苗組比空載體組和空白對照組小鼠穿越目標象限的次數(shù)分別增加48％和44％(P<0.05)。免疫組化結果顯示疫苗組小鼠大腦皮質和海馬內老年斑的面積百分比及海馬內老年斑的數(shù)量比對照組均高50％。主要臟器HE染色未見明顯病理毒性。以上結果表明NGI重組