萊菔子多糖的分離純化、生化鑒定及功能性質(zhì)的初步研究.pdf

1、萊菔子作為藥食同源植物材料，在我國(guó)有著悠久的使用歷史和廣泛的來源。萊菔子具有諸多保健功能，如抗菌、降壓、祛痰鎮(zhèn)咳平喘、增強(qiáng)消化道運(yùn)動(dòng)和抗腎上腺素的作用。目前，對(duì)萊菔子功能成分的研究主要在水溶性生物堿與萊菔子素，對(duì)其多糖成分的研究較少。 本文對(duì)萊菔子(SemenRaphani)多糖的提取、分離純化、理化性質(zhì)、抑菌及保鮮作用等進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，為萊菔子的開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)，對(duì)充分利用我國(guó)中藥資源具有重要意義。 通過單

2、因素實(shí)驗(yàn)與正交實(shí)驗(yàn)研究確定了萊菔子多糖熱水浸提及微波輔助提取的最佳工藝參數(shù)分別為：料液比1：35，浸提溫度75℃，熱水浸提時(shí)間3h，浸出率為6.85％.微波功率540W，料液比1：30，微波處理10min，浸出率達(dá)5.63％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微波輔助能明顯縮短浸提時(shí)間，提高多糖浸出率。萊菔子多糖醇沉工藝的研究結(jié)果表明，浸提液加入4倍體積無水乙醇，醇沉4h，沉淀得率最大。 分別采用Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-正丁醇法脫除萊菔

3、子粗多糖中蛋白質(zhì)，對(duì)3種脫蛋白方法的工藝進(jìn)行研究，得到各自的最佳工藝參數(shù)，并進(jìn)行比較。研究發(fā)現(xiàn)：萊菔子多糖宜采用三氯乙酸-正丁醇法脫蛋白，最佳工藝參數(shù)：樣液與三氯乙酸-正丁醇混合液體積比1：2，三氯乙酸與正丁醇體積比1：15，振蕩時(shí)間30min，靜置時(shí)間1h，蛋白脫除率達(dá)68.68％，多糖損失率僅為14.71％，具有較好的脫蛋白效果。對(duì)粉末活性炭與過氧化氫2種脫色方法的工藝研究結(jié)果表明：粉末活性炭有一定的脫色效果，但多糖損失較嚴(yán)重，萊菔

4、子多糖采用H2O2脫色率明顯高于粉末活性炭脫色。 萊菔子粗多糖經(jīng)脫蛋白、脫色、透析除雜，得到萊菔子多糖SRP。SRP經(jīng)DEAE-纖維素柱層析，分別用磷酸鹽緩沖液，NaCL溶液，NaOH溶液洗脫，收集磷酸鹽洗脫的主要組分，記為SRPa。SRPa經(jīng)SephadexG-200凝膠柱層析，洗脫曲線呈單一峰，同時(shí)用醋酸纖維薄膜電泳進(jìn)行純度鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明SRPa是均一中性多糖。采用SephadexG-200凝膠法和HPLC法測(cè)定SRPa