微小病毒B19感染與Kikuchi病的相關性及其發(fā)病機理的初步研究.pdf

1、Kikuchi病(Kikuchi-FujimotoDisease，KFD)又稱為組織細胞性壞死性淋巴結炎(histiocyticnecrotizinglymphadenitis)，由日本學者Kikuchi和Fujimoto于1972年首先報道。是一種主要累及淋巴結的自限性全身性疾病。世界各地均有發(fā)病，但以東方青年女性多見。其病理特征主要為淋巴結散在灶片狀壞死，伴有大量組織細胞浸潤。到目前為止，KFD的病因仍不清楚。 在KFD的病

2、因學研究中，有幾篇報道涉及到B19病毒，但仔細分析這些文章就會發(fā)現(xiàn)，其中所述的KFD都伴發(fā)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡或者嗜血細胞綜合癥，并不是獨立的疾病。而對于獨立的原發(fā)性KFD(idiopathicKFD，iKFD)，僅有1篇文獻研究了二者的相關性但得到了陰性結果。 在此，本實驗首先按照KFD的診斷標準經(jīng)HE、CD68免疫組化染色、結合臨床資料并排除木村病、類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、結核等其它可引起淋巴結碎屑樣壞死的疾病而篩選了3

3、3例iKFD患者進入實驗。同時以16例淋巴結反應性增生患者作為對照。 然后，我們通過nPCR、ISH和IHC獨立地采用雙盲法檢測了33例iKFD和16例淋巴結反應性增生患者淋巴結活檢組織中微小病毒B19的核酸和蛋白。結果表明，通過這三種方法分別在87.1％、69.7％和57.6％的iKFD患者淋巴結組織中檢測出B19病毒核酸或蛋白。而在反應性增生淋巴結中，其陽性率分別為56.3％、31.3％和25.0％。經(jīng)統(tǒng)計學檢驗，二組間感染

4、率差別顯著(PCR中，P=0.029；ISH中，P=0.011；IHC中，P=0.032，前者經(jīng)Fisher精確檢驗，后二者經(jīng)x2檢驗)。 接著采用免疫組化-原位雜交雙標記的方法分析在iKFD中B19病毒感染的細胞類型。發(fā)現(xiàn)CD20+B淋巴細胞、CD68+組織細胞及CD4+T淋巴細胞均有少數(shù)細胞感染B19病毒，而CD8+細胞毒性T淋巴細胞則大量被感染。 最后我們在pEGFP-C2質粒的基礎上構建了B19病毒主要致病蛋白N

5、S1的真核表達質粒pEGFP-NS1，為繼續(xù)探討B(tài)19病毒對靶細胞的作用機制奠定了基礎。 綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)微小病毒B19基因組DNA和病毒衣殼蛋白在iKFD病變淋巴結中有著顯著的高陽性率，揭示iKFD可能與微小病毒B19感染有關，為KFD的病因學研究提供了新線索；發(fā)現(xiàn)了在iKFD中微小病毒B19感染的細胞類型以CD8+細胞毒性T淋巴細胞細胞為主，少部分CD4+輔助T細胞、CD20+B淋巴細胞、CD68+組織細胞亦被B19病毒