雜色曲霉素對體外培養(yǎng)GES-1細胞CyclinB1、Cdc2和Cdc25C表達影響的研究.pdf_第1頁
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1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文雜色曲霉素對體外培養(yǎng)GES1細胞CyclinB1、Cdc2和Cdc25C表達影響的研究姓名：王娟申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：張祥宏邢凌霄20090301中文摘要階段。真核細胞中，G2M進程由細胞周期蛋白B(CyclinB)Cdc2復合物調(diào)控。CyelinB1／Cdc2是由Cdc25C激活從而促進細胞從G2期進入M期，Cdc25C的活性是細胞周期進入M期的關鍵之一。因此，在前期研究的基礎之上

2、，本實驗研究了ST對體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細胞的CyclinBl、Cdc2、Cdc25C表達的影響，以期探討G2期阻滯的相關分子的變化在ST誘導胃黏膜上皮細胞G2期阻滯中的意義。方法：1細胞培養(yǎng)與處理GES1細胞培養(yǎng)于含10％胎牛血清、105U／L青霉素、100mg／L鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中，37℃、5％C02培養(yǎng)，細胞貼壁生長。選擇對數(shù)生長期的細胞(傳代后24h)隨機分為空白對照組、溶劑對照組、實驗組。實驗組給予DMSO溶解、生理鹽水稀

3、釋的ST，使其終濃度分別為100、500、1000、200099／L，對照組給予等體積生理鹽水，溶劑對照組給予等體積DMSO溶液，繼續(xù)培養(yǎng)24h收集細胞進行相關指標檢測。2蛋白免疫印跡(WesternBlotting)提取細胞總蛋白，用蛋白免疫印跡方法，檢測ST處理后人胃黏膜上皮細胞GES1中CyclinBl、Cdc2／磷酸化型Cdc2和Cdc25C／j磷酸化型Cdc25C的表達情況。3細胞總RNA的提取、鑒定及定量采用異硫氰酸胍一步法

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