巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在食管癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、背景與目的:
　　 食管癌是人類(lèi)常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,發(fā)病率在世界范圍內(nèi)居第6位,在我國(guó)有著更高的發(fā)病率。我省是食管癌的高發(fā)區(qū),尤其是林州等地區(qū)有著更高的發(fā)病率。食管癌的發(fā)生和發(fā)展涉及多種抑癌基因和原癌基因的改變,現(xiàn)在還不能在分子水平上對(duì)食管癌做出充分的解釋。食管癌早期癥狀隱匿,大多數(shù)患者就診時(shí)已處于晚期,即使手術(shù)切除,預(yù)后仍很差。目前已經(jīng)開(kāi)展很多關(guān)于食管癌形態(tài)學(xué)和臨床病理特征的相關(guān)研究,但是到目前為止仍然沒(méi)有找到一種具有臨床實(shí)

2、用價(jià)值的預(yù)測(cè)因子。如能很好的判斷預(yù)后,對(duì)篩選高危病人及幫助制定個(gè)體化治療方案大有裨益。
　　 近年來(lái)腫瘤微環(huán)境中間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞因子等對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移等有重要作用,有報(bào)道食管癌的發(fā)生發(fā)展與炎癥微環(huán)境關(guān)系密切。巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)主要來(lái)源于活化T淋巴細(xì)胞,可以抑制腫瘤微環(huán)境中巨噬細(xì)胞的游走。MIF功能復(fù)雜,不僅可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、參與炎癥反

3、應(yīng),而且在多種組織器官纖維化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。有研究報(bào)道MIF在多種腫瘤細(xì)胞中高表達(dá),如肺癌、肝癌、食管癌、結(jié)直腸癌、頭頸部鱗癌等。結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissue growth factor,,CTGF)屬于生長(zhǎng)因子CCN基因家族,該家族還包括Cyr61(cysteine-rich61)、腎母細(xì)胞瘤過(guò)度表達(dá)基因(nephroblastoma over-expressed gene,Nov／CCN3)、Wisp-1

4、／elml(CCN4)、Wisp-2／rCov1(CCN5)、Wisp-3(CCN6)。CTGF通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境中重要的間質(zhì)細(xì)胞——成纖維細(xì)胞增殖,并分泌細(xì)胞外基質(zhì),參與多種細(xì)胞的生物學(xué)功能,如細(xì)胞增殖、黏附、血管生成和器官纖維化,而且和多種惡性腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)移及其預(yù)后有密切關(guān)系。本研究采用免疫組織化學(xué)染色法分別檢測(cè)MIF和CTGF在84例食管癌組織中的表達(dá)情況,分析這二者的表達(dá)水平與食管癌臨床病理特征之間的關(guān)系及其對(duì)患者預(yù)后影

5、響,并探討可能的調(diào)節(jié)途徑及作用機(jī)制。目的在于能夠?yàn)槭彻馨┑念A(yù)后評(píng)估及基因治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.收集2004年1月1日-2006年6月30日于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院和河南省腫瘤醫(yī)院胸外科接受手術(shù)切除的84例食管癌標(biāo)本,所有標(biāo)本均經(jīng)病理確診。所有病例無(wú)糖尿病、類(lèi)風(fēng)濕、甲狀腺功能亢進(jìn)等其他疾病,術(shù)前未接受化放療或針對(duì)腫瘤治療的靶向治療。臨床病歷資料完整,電話隨訪所有患者,截止日期為2010年6月30日；生存

6、時(shí)間以月為單位,計(jì)算自手術(shù)之日至死亡或最后隨訪時(shí)間；
　　 2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)MIF和CTGF在84例食管癌組織中的表達(dá)水平,并分析這兩個(gè)指標(biāo)與食管癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系及其表達(dá)水平對(duì)預(yù)后的影響,探討其在食管癌中的作用；
　　 3.采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料比較采用x2檢驗(yàn),采用Kaplan-Meier法計(jì)算生存率及描繪生存曲線,Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行多因素生存分析,

7、Spearman等級(jí)相關(guān)進(jìn)行MIF和CTGF表達(dá)的相關(guān)性分析,以a=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.MIF在食管癌組織中廣泛表達(dá),陽(yáng)性著色呈灶狀或彌漫性分布,主要位于腫瘤細(xì)胞細(xì)胞質(zhì),呈棕黃色顆粒,也有少數(shù)表達(dá)于細(xì)胞核。MIF的表達(dá)與食管癌患者的年齡、性別、組織學(xué)類(lèi)型、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤分化程度在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)明顯差異(P>0.05),但是與患者的腫瘤浸潤(rùn)深度(P=0.006)和臨床分期密切相關(guān)(P=0.

8、023)；
　　 2.CTGF陽(yáng)性蛋白主要定位于腫瘤細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)或胞膜,棕黃色或棕褐色顆粒,還可見(jiàn)于癌組織周?chē)拈g質(zhì)纖維結(jié)締組織和平滑肌。CTGF的表達(dá)與患者的年齡、性別、組織學(xué)類(lèi)型、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤分化程度在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)明顯差異(P>0.05),但與患者的腫瘤浸潤(rùn)深度(P=0.011)和臨床分期密切相關(guān)(P=0.006);
　　 3.在84例食管癌組織中MIF表達(dá)分陰性、陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性3組,生存曲線分析顯示,強(qiáng)陽(yáng)性表

9、達(dá)組與患者預(yù)后顯著負(fù)相關(guān),陰性和陽(yáng)性表達(dá)組術(shù)后累計(jì)生存率顯著高于強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)組(P=0.021)；
　　 4.CTGF分高表達(dá)和低表達(dá)兩組,高表達(dá)組與低表達(dá)組相比,高表達(dá)組患者生存低于低表達(dá)組,即CTGF高表達(dá)組與患者預(yù)后顯著負(fù)相關(guān)(P=0.001)；
　　 5.以患者的年齡、性別、腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤分化程度、癌組織中CTGF和MIF表達(dá)水平為變量,進(jìn)行Cox多因素回歸分析,結(jié)果顯示,食管癌的獨(dú)立預(yù)

10、后因素為T(mén)NM分期(P=0.002)、腫瘤分化程度(P=0.000)及CTGF表達(dá)水平(P=0.023)(見(jiàn)表3)；
　　 6.食管癌組織中MIF和CTGF蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析,在84例食管癌組織標(biāo)本中,MIF和CTGF同時(shí)低表達(dá)為30例,同時(shí)高表達(dá)為21例,通過(guò)2×2配對(duì)資料的關(guān)聯(lián)性分析,顯示二者在食管癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.238,P=0.024)。
　　 結(jié)論:
　　 1.MIF和CTGF在食管

11、癌中的表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度和臨床分期密切相關(guān),提示其高表達(dá)促進(jìn)了食管癌的發(fā)展和浸潤(rùn),炎癥反應(yīng)和纖維化與食管癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系；
　　 2.MIF和CTGF高表達(dá)患者預(yù)后較差,低表達(dá)組預(yù)后較好,提示二者在食管癌的轉(zhuǎn)歸過(guò)程中有重要作用,臨床上可以提示食管癌患者的預(yù)后情況；
　　 3.MIF和CTGF在食管癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系,說(shuō)明二者在食管癌中的高表達(dá)可能具有協(xié)同作用,共同參與了食管癌的發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移過(guò)程。