中藥五靈脂對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠細(xì)胞間黏附分子-1的影響.pdf

1、背景:動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)所致冠心病嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康，也給家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重負(fù)擔(dān)。研究顯示，AS是一種慢性炎癥過(guò)程，細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)與此過(guò)程關(guān)系密切。ICAM-1屬于免疫球蛋白超家族成員，主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，但正常情況下僅為低水平或不表達(dá)。在AS炎癥發(fā)展過(guò)程中單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的黏附主要靠

2、ICAM-1介導(dǎo)。細(xì)胞外的黏附分子能被酶分解并在血清中檢測(cè)到，稱(chēng)為可溶性黏附分子。中醫(yī)學(xué)“胸痹心痛”相當(dāng)于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的冠心病心絞痛?；钛鲋兴幘哂泻芎玫目笰S作用，但其機(jī)制尚不明了。本課題旨在觀察五靈脂水提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性AS大鼠ICAM-1表達(dá)的影響，探討其抗AS作用的機(jī)制，豐富中醫(yī)藥治療冠心病的理論基礎(chǔ)。 方法:將健康、清潔、雄性6w齡Wistar大鼠60只隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、五靈脂低劑量組、五靈脂高劑量組，采用高脂飲食

3、結(jié)合腹腔注射維生素D3注射液復(fù)制動(dòng)脈粥樣硬化模型，經(jīng)病理槍測(cè)證實(shí)模型復(fù)制成功后五靈脂低、高劑量組大鼠分別給予五靈脂水提取物不同劑量(2.5g/kg體重、10g/kg體重)灌胃干預(yù)。給藥6w后采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)大鼠血清可溶性細(xì)胞間黏附分子-1(soluble intercellular adhesionmolecule-1，sICAM-1)水平，免疫組織化學(xué)法觀察主動(dòng)脈ICAM-1表達(dá)，透射電鏡觀察主動(dòng)脈內(nèi)膜病變情況。 結(jié)果:大

4、鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型復(fù)制成功。ELISA結(jié)果顯示，空白對(duì)照組大鼠血清含微量sICAM-1(為3.10±0.42 ng/ml)，明顯低于其它組(P<0.01)。藥物干預(yù)后五靈脂低劑量組、五靈脂高劑量組大鼠血清sICAM-1(分別為42.73±6.97、21.29±4.27 ng/ml)較干預(yù)前(分別為82.26±6.72、82.41±7.06 ng/ml)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，也顯著低于模型組(P<0.01)。免疫組化

5、結(jié)果顯示，模型組大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性，藥物干預(yù)后五靈脂低劑量組、五靈脂高劑量組大鼠ICAM-1表達(dá)明顯減少(P<0.01)，五靈脂高劑量組輕于五靈脂低劑量組(P<0.05)，但仍明顯高于空白對(duì)照組(P<0.05)。透射電鏡結(jié)果顯示，空白對(duì)照組大鼠主動(dòng)脈透射電鏡觀察可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞間連接緊密，無(wú)細(xì)胞腫脹、脫落等，內(nèi)皮下間隙正常；模型組見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞明顯腫脹，部分脫落，細(xì)胞間連接中斷，表面有單核細(xì)胞黏附，內(nèi)皮下泡沫細(xì)胞堆積，內(nèi)皮

6、下間隙變窄；五靈脂低劑量、五靈脂高劑量組大鼠主動(dòng)脈病變明顯輕于模型組，五靈脂高劑量組病變輕于五靈脂低劑量組。 結(jié)論:1.高脂飼料(配方為3％膽固醇，0.5％膽酸鈉，0.2％丙基硫氧嘧啶，5％白糖，10％豬油，81.3％基礎(chǔ)飼料)配合腹腔注射維生素D3注射液能夠形成大鼠AS動(dòng)物模型，但該配方仍有待改進(jìn)。 2.AS大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性，血清sICAM-1水平明顯升高，其與AS炎癥關(guān)系密切。 3.中