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文檔簡介
1、目的:通過檢測鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子5(KLF5)在腎癌組織、癌旁組織中的蛋白表達(dá),分析其在腎癌組織與癌旁組織中的表達(dá)水平,探討KLF5蛋白表達(dá)與腎癌臨床生物學(xué)特征的關(guān)系。
方法:組織標(biāo)本來源:收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院2010年1月至2011年10月所收治的55例腎癌患者的臨床資料、癌組織標(biāo)本及10例癌旁組織(距離瘤體邊緣5cm以外)標(biāo)本。全部患者在手術(shù)之前均未經(jīng)過任何放、化療。
1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測55例腎癌組織,
2、10例癌旁組織中KLF5的表達(dá)情況及其各臨床病理參數(shù)的關(guān)系。
2.采用手術(shù)切除的腎癌新鮮組織10例,以距離瘤體邊緣5cm以外的癌旁組織作為對照,運用RT-PCR檢測方法,以β-Actin為內(nèi)對照,檢測KLF5 mRNA在腎癌組織及癌旁組織中的表達(dá)。
3.采用手術(shù)切除的腎癌新鮮組織10例,以距離瘤體邊緣5cm以外的癌旁組織作為對照,運用Western blotting檢測方法,以β-Actin為內(nèi)對照,檢測KLF5在腎
3、癌組織及癌旁組織中的表達(dá)。使用Image-pro plus Version6.0專業(yè)圖像分析軟件對實驗結(jié)果圖像行灰度值測定。
結(jié)果:
1.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:(1)KLF5在腎癌組織和癌旁組織中均有表達(dá)。在腎癌組織中KLF5一般呈彌漫性、失極性表達(dá),染色的程度增高,且大部分位于胞膜與胞漿中表達(dá),然而在癌旁組織中僅在遠(yuǎn)曲小管與集合管細(xì)胞之胞膜、胞漿中存在表達(dá),染色的強度為中等,并且呈現(xiàn)出頂極分布。KLF5在腎癌組
4、織與癌旁組織中的陽性表達(dá)率具有顯著差異性,在腎癌組織中的表達(dá)顯著高于癌旁組織。(2)KLF5的表達(dá)和患者性別、年齡、腫瘤位置、組織學(xué)類型之間無顯著相關(guān),與腎癌組織學(xué)分級之間也無顯著相關(guān),但與腎癌的臨床分期具有顯著的差異性,且呈現(xiàn)出正相關(guān),在有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的癌組織中的表達(dá)顯著高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的癌組織,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.RT-PCR檢測結(jié)果顯示:在腎癌組織中KLF5 mRNA表達(dá)量明顯高于癌旁組織:癌旁組織中KLF5 mRNA
5、的陽性表達(dá)率為30.0%(3/10),而腎癌組織中KLF5 mRNA的陽性表達(dá)率為100.0%(10/10)。KLF5 mRNA在癌旁組織和腎癌組織之間的陽性表達(dá)率呈上升趨勢,兩者之間差異性有統(tǒng)計學(xué)意義。
3.Western blotting檢測結(jié)果顯示:使用Image-pro plus Version6.0專業(yè)圖像分析軟件對實驗結(jié)果圖像行灰度值測定,計算得出X2=625.38,表示KLF5蛋白在腎癌組織和癌旁組織中表達(dá)差異有
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