藥用白芍優(yōu)良種質(zhì)資源的篩選研究.pdf

1、白芍為我國(guó)常用大宗藥材，是很多方劑配伍的組成成分，在我國(guó)大面積種植。白芍在我國(guó)栽培品種雖多，但大部分是未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格鑒定的自選農(nóng)家品種，由于白芍的繁殖方式大都為分株繁殖，造成白芍品種嚴(yán)重退化，影響白芍的產(chǎn)量和質(zhì)量。本次研究基于以上問(wèn)題，以高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)為目標(biāo)，首先對(duì)白芍目前的繁殖方式進(jìn)行調(diào)查，并進(jìn)一步對(duì)收集到的白芍種質(zhì)資源的綜合質(zhì)量進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。以安徽毫州和北京白芍種質(zhì)為主要研究對(duì)象，分別對(duì)白芍生物學(xué)性狀、主要化學(xué)成分的含量、白芍HPLC指紋圖

2、譜和白芍的親緣關(guān)系進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1.目前藥用白芍的主要繁殖方式是分株繁殖，種子繁殖在逐步發(fā)展，但是白芍種子種苗沒(méi)有相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)加強(qiáng)白芍種子種苗檢驗(yàn)規(guī)程的研究，實(shí)現(xiàn)規(guī)范化管理。
　　對(duì)收集到的不同種質(zhì)白芍的生物學(xué)性狀進(jìn)行觀測(cè)，綜合各個(gè)性狀的比較結(jié)果，毫州2號(hào)在收集到的種質(zhì)中具有很大優(yōu)勢(shì)。
　　2.收集到的不同種質(zhì)白芍芍藥苷含量均達(dá)到《中國(guó)藥典》的要求，而且不同種質(zhì)的白芍芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷含量有

3、較大的差異，毫州的3份種質(zhì)資源兩種化學(xué)成分均較高，北京3份種質(zhì)資源兩種化學(xué)成分含量差別較大，其中北京3號(hào)芍藥內(nèi)酯苷含量最高，已超過(guò)其芍藥苷的含量。
　　通過(guò)比較白芍藥材去皮與未去皮兩種不同的處理結(jié)果，發(fā)現(xiàn)整體情況下芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷含量未去皮處理高于去皮處理。
　　3.比較了不同條件下建立白芍HPLC指紋圖譜，選擇出最佳條件:色譜條件:流速為1mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，柱溫30℃，流動(dòng)相:A-0.1％磷酸，B-乙腈

4、，梯度洗脫0-10min A95％-87％，10-35min A87％-78％，35-45min A78％-35％，45-50minA35％-20％,50-60min A20％-20％，60-65min A20％-95％。分析收集到白芍種質(zhì)資源的指紋圖譜的相似度，建立了指紋圖譜共有模式，為白芍種質(zhì)資源評(píng)價(jià)提供一定的參考。
　　4.選擇條帶清晰、多態(tài)性高、重復(fù)性好的7條引物進(jìn)行擴(kuò)增，共獲得56條片段，其中多態(tài)性條帶38條，平均多態(tài)性

5、比率為67.86％;運(yùn)用NTSYS軟件計(jì)算樣品間的遺傳相似系數(shù)（GS值），得到樣品間遺傳相似系數(shù)矩陣，其中毫州1號(hào)和毫州2號(hào)間相似系數(shù)最大，說(shuō)明兩者間親緣關(guān)系較近，遺傳差異小，北京2號(hào)和山西野生白芍相似系數(shù)最小，說(shuō)明兩者間親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，遺傳差異大;利用UPGMA法，根據(jù)遺傳相似系數(shù)對(duì)各樣品進(jìn)行聚類分析，在GS值為0.72時(shí)把14個(gè)樣品分為兩大類群，北京和安徽栽培白芍為一個(gè)類群，其他品種為另一個(gè)類群。4個(gè)產(chǎn)區(qū)的栽培白芍和山西野生白芍存在一