人子宮內(nèi)膜VEGF表達(dá)及其調(diào)控因素研究.pdf

1、[目的] 建立在位子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外分離培養(yǎng)模型，分析血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在人類子宮內(nèi)膜的表達(dá)及對(duì)其影響的調(diào)控因素，探討VEGF在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生發(fā)展中的作用。 [方法] 選擇因子宮腺肌癥行(次)全子宮切除手術(shù)的病例8名，手術(shù)中取其子宮內(nèi)膜，經(jīng)酶解、過(guò)濾、貼壁純化等技術(shù)體外分離培養(yǎng)子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞，并對(duì)傳代后的細(xì)胞施加刺激物，分成常氧(O<,2>分壓19-21Kp)和缺氧(O<,2>分壓8-11Kp)組，每組用3種條件：

2、雌二醇(E<,2>，濃度10<'-8>mol/L)、黃體酮(P，濃度5×10<'-7>mol/L)、E<,2>+P(E<,2>濃度為10<'-8>mol/L，P濃度為5×10<'-7>mol/L)干預(yù)并用單純培養(yǎng)基作為對(duì)照，作用24小時(shí)，撤離刺激條件后同一時(shí)間點(diǎn)分別收集各種因素作用后的細(xì)胞及相應(yīng)上清液，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR(Real-Time RT-PCR)方法檢測(cè)細(xì)胞VEGF mRNA含量。 [結(jié)果] 8例標(biāo)本培養(yǎng)間質(zhì)

3、細(xì)胞，6例成功，在位子宮內(nèi)膜中VEGF的表達(dá)在缺氧及類固醇激素的影響下上調(diào)明顯。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法細(xì)胞中VEGF mRNA相對(duì)表達(dá)量：缺氧組在E<,2>、P、E<,2>+P干預(yù)下及單純培養(yǎng)基空白對(duì)照分別為7.22±1.09、7.92±1.10、7.87±1.13及8.23±1.18；常氧組依次分別為6.07±1.04、6.75±1.02、6.19±1.06及9.94±1.34。兩組間干預(yù)前后對(duì)比，缺氧后細(xì)胞VEGF mRNA明

4、顯升高(P<0.05)，組內(nèi)比較，雌、孕激素單獨(dú)及聯(lián)合干預(yù)下VEGF mRNA含量較空白對(duì)照升高(P<0.05)。并且發(fā)現(xiàn)，缺氧聯(lián)合類固醇激素刺激與單一缺氧或激素作用相比，不增加細(xì)胞VEGF mRNA的表達(dá)(P>0.05)。 [結(jié)論] 實(shí)驗(yàn)采用的方法獲得在位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞作為體外細(xì)胞模型簡(jiǎn)便高效；在位子宮內(nèi)膜表達(dá)一定水平VEGF，類固醇激素、缺氧可影響其表達(dá)強(qiáng)度，缺氧是子宮內(nèi)膜VEGF表達(dá)上調(diào)的重要影響因素，且不受同時(shí)應(yīng)用的雌