溶血磷脂酸在卵巢癌發(fā)生機制中作用的初步探討.pdf

1、目的
　　 研究血漿溶血磷脂酸(LPA)對卵巢癌細胞增殖的影響，選用促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信號傳導通路特異性阻滯劑PD98059，阻斷MAPK信號傳導通路后，觀察溶血磷脂酸對卵巢癌細胞作用的變化，從而初步探討溶血磷脂酸促卵巢癌細胞增殖的作用機制。
　　 方法
　　 體外培養(yǎng)人卵巢上皮癌細胞株SKOV3細胞，選用MAPK信號傳導通路特異性阻斷劑PD98059，將細胞隨機分為四組:正常對照組(NC組:不加

2、任何藥物)、溶血磷脂酸組（LPA組:加入不同濃度的溶血磷脂酸）、PD98059組（PD98059組:加入10μmol/L的PD98059）和溶血磷脂酸+PD98059組（LPA+PD98059組:加入不同濃度的溶血磷脂酸和10μmol/L的PD98059）。應用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法測定溶血磷脂酸對SKOV3細胞增殖活性的影響，聯(lián)合應用PD98059阻斷MAPK信號傳導通路時，測定SKOV3細胞增殖活性的變化;應用實時熒光定量R

3、T-PCR測定溶血磷脂酸單獨或合用PD98059對SKOV3細胞表達環(huán)氧化酶-2(COX-2)的影響;應用流式細胞儀(FCM)測定細胞的凋亡及細胞增殖周期動力學的變化。
　　 結果
　　 溶血磷脂酸(濃度＞10μmol/L)以劑量依賴方式促進SKOV3細胞增殖，PD98059顯著抑制溶血磷脂酸促增殖作用(P＜0.05)。RT-PCR結果顯示，溶血磷脂酸能促進環(huán)氧化酶-2的表達(P＜0.05)，隨著溶血磷脂酸濃度的增高，S

4、KOV3細胞環(huán)氧化酶-2基因表達增多(P＜0.05)，而合用PD98059后環(huán)氧化酶-2的表達降低(P＜0.05)。FCM結果顯示，溶血磷脂酸能促進細胞增殖，抑制細胞凋亡，增加S期比率，而合用PD98059后溶血磷脂酸促增殖作用消失，且G0/G1期細胞比率升高，S期細胞比率降低。
　　 結論
　　 血漿溶血磷脂酸以濃度依賴的方式促進卵巢癌SKOV3細胞的增殖，抑制SKOV3細胞凋亡，應用MAPK信號傳導通路特異性阻斷劑P