端粒長(zhǎng)度與缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)性研究.pdf

1、背景和目的：
　　腦卒中(stroke)作為發(fā)達(dá)國(guó)家的第2大死因，發(fā)展中國(guó)家的第3大死因，是全球面臨的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。我國(guó)腦卒中患者超過(guò)700萬(wàn)，腦卒中年平均發(fā)病率為236.6/10萬(wàn)，年平均死亡率為124.5/10萬(wàn)，具有高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高致殘率和高死亡率的特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅人群健康，并帶來(lái)沉重的疾病負(fù)擔(dān)。
　　目前我國(guó)已開(kāi)展對(duì)社區(qū)人群進(jìn)行腦卒中危險(xiǎn)因素的篩查工作，年齡、高血壓、房顫、吸煙、超重與肥胖、糖尿病等傳統(tǒng)的危險(xiǎn)

2、因素以及新的腦卒中危險(xiǎn)因素如血漿同型半胱氨酸(homocysteine Hcy)水平與頸動(dòng)脈內(nèi)-中膜厚度(Carotid artery intia-media thickness，CIMT)已納入腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)人群的等級(jí)評(píng)估指標(biāo)中。但這些危險(xiǎn)因素中沒(méi)有反映機(jī)體分子遺傳變異的相關(guān)指標(biāo)。近年來(lái)研究表明，人體外周血液白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度(telomere length，TL)變化與上述危險(xiǎn)因素有關(guān)，其機(jī)制中包括由于氧化應(yīng)激和炎癥累積負(fù)擔(dān)所致。已有報(bào)

3、道表明腦卒中患者的端粒長(zhǎng)度較對(duì)照人群縮短，但未指出腦卒中患者在不同危險(xiǎn)因素聚集狀態(tài)下端粒長(zhǎng)度變化的差異。端粒是位于真核生物染色體末端的具有保護(hù)作用的帽子結(jié)構(gòu)，由富含鳥(niǎo)氨酸的串聯(lián)重復(fù)序列(5’-TTAGG-3’)及相關(guān)蛋白組成。端粒長(zhǎng)度的變化反映出機(jī)體內(nèi)在因素和環(huán)境因素相互作用的結(jié)果，機(jī)體不同危險(xiǎn)因素聚集狀態(tài)下的端粒長(zhǎng)度變化將會(huì)反映機(jī)體的綜合疾病風(fēng)險(xiǎn)。
　　本研究采用描述性流行病學(xué)研究方法，入選急性新發(fā)缺血性腦卒中患者作為研究對(duì)象，

4、通過(guò)收集患者流行病學(xué)資料與臨床資料，采集患者外周靜脈血提取DNA，分析患者不同危險(xiǎn)因素聚集狀態(tài)下端粒長(zhǎng)度的差異，探討端粒長(zhǎng)度變化在缺血性腦卒中患者風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中的價(jià)值，為將其納入社區(qū)人群的腦卒中危險(xiǎn)因素篩查指標(biāo)的合理性提供依據(jù)。
　　對(duì)象和方法：
　　研究對(duì)象為2012年9月至2014年10月間汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科的新發(fā)缺血性腦卒中住院患者，共征集了392例，其中男性226例，女性166例，年齡24~92歲，平均年

5、齡(66.5±11.2)歲。所有參與者均符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)，自愿參加并簽署知情同意書(shū)。本研究獲得汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
　　采用問(wèn)卷調(diào)查收集流行病學(xué)資料，以采集病歷信息的方式收集包括既往病史、腦卒中分型、入院與出院時(shí)的NHISS評(píng)分、CIMT值等臨床指標(biāo)；生化指標(biāo)包括血漿Hcy、血脂4項(xiàng)以及血糖。采用DNA提取試劑盒提取外周血液中的 DNA，采用Real time PCR技術(shù)檢測(cè)端粒長(zhǎng)度。
　　采用EPiData3.0

6、建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，計(jì)數(shù)資料采用率(％)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。兩組或多組均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)或方差分析，兩組或多組率的比較采用χ2檢驗(yàn)。缺血性腦卒中患者端粒長(zhǎng)度的影響因素采用多元線(xiàn)性回歸分析。端粒長(zhǎng)度與年齡、頸動(dòng)脈內(nèi)-中膜厚度、同型半胱氨酸、血壓、血糖以及疾病聚集等級(jí)之間的相關(guān)性采用Person積矩相關(guān)或Spearman秩相關(guān)探討。統(tǒng)計(jì)分析采用雙側(cè)檢驗(yàn)，顯著性檢

7、驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05。
　　結(jié)果：
　　1．缺血性腦卒中患者合并兩種或以上疾病組的年齡、SBP、DBP、NIHSS差值、CIMT均值、動(dòng)脈硬化評(píng)分、TC、TG、LDL、Glu等指標(biāo)水平高于其他兩組患者的相應(yīng)指標(biāo)水平，而TL則低于其他兩組(P<0.05)。
　　2．端粒長(zhǎng)度與年齡(r=-0.252，P<0.001)、血漿Hcy(r=-0.122，P=0.041)、CIMT均值(rs=-0.118，P=0.045)、SBP

8、(r=-0.140，P=0.011)、DBP(r=-0.109，P=0.050)以及血糖(r=-0.120，P=0.030)呈負(fù)相關(guān)；
　　3．不同的Hcy水平下端粒長(zhǎng)度有差別，隨著Hcy水平等級(jí)的增加，端粒長(zhǎng)度逐漸減少(P<0.05)，Hcy第三分位下端粒長(zhǎng)度明顯減少(TL=1.628，P=0.035)。不同等級(jí)的Hcy與TL的組合下，高分位Hcy+低分位TL組在年齡、血壓、CIMT均值、NIHSS評(píng)分差值等指標(biāo)均值均高于低分位

9、Hcy+高分位TL組(P<0.05)，且男性、飲酒、高血壓、房顫等指標(biāo)的構(gòu)成比均高于低分位Hcy+高分位TL組(P<0.05)。
　　4．影響端粒長(zhǎng)度的因素有年齡(B=-0.002；P<0.001)，Hcy水平(B=-0.023；P=0.038)，CIMT均值(B=-0.477，P=0.002)，DBP(B=-0.001，P=0.002)以及吸煙(B=-0.023，P=0.034)。
　　5．以篩選出的影響端粒長(zhǎng)度的危險(xiǎn)因素

10、為依據(jù)，將缺血性腦卒中患者按照年齡≤65y、不吸煙、低Hcy、低DBP以及低CIMT的組合為參照，缺血性腦卒中患者隨著危險(xiǎn)因素個(gè)數(shù)的減少，端粒長(zhǎng)度逐漸增加(P<0.05)，與等級(jí)相關(guān)分析的結(jié)果相符合(rs=0.224，P=0.002)；以年齡>65y、吸煙、高Hcy、高DBP以及高CIMT的組合為參照，缺血性腦卒中患者隨著危險(xiǎn)因素的增加，端粒長(zhǎng)度逐漸縮短(P<0.05)，與等級(jí)相關(guān)分析的結(jié)果相符合(rs=-0.147，P=0.012)。