二苯乙烯苷對小鼠海馬依賴性學習記憶的影響及機制.pdf

1、文章從以下兩部分就二苯乙烯苷對小鼠海馬依賴性學習記憶的影響及機制進行了綜述。
　　第一部分二苯乙烯苷對小鼠海馬依賴性學習記憶的影響
　　目的:隨著我國老齡化速度不斷增快,阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)、帕金森病(Parkinson’s disease,PD)及血管性癡呆(vascular dementia,VD)等衰老相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病的研究、預(yù)防和治療已成為刻不容緩的問題。何首烏作為一種從我

2、國古代沿用至今的抗衰老名貴中藥,其主要活性成分是具有多酚結(jié)構(gòu)的二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucosid,THSG)。近來有研究發(fā)現(xiàn),THSG可明顯改善衰老大鼠和APP轉(zhuǎn)基因AD模型鼠的學習記憶能力。本實驗室前期研究也發(fā)現(xiàn)THSG可促進小鼠的海馬突觸可塑性。本實驗旨在從行為學角度研究慢性給予THSG對小鼠正常學習記憶能力的影響。
　　方法:將C57BL小鼠分為四組(對照組:生理鹽水,NS;低劑量組:TH

3、SG20 mg/kg;中劑量組:THSG40 mg/kg;高劑量組:THSG80 mg/kg),連續(xù)灌胃給藥一個月。通過行為學和離體場電位實驗來觀察THSG對小鼠正常學習記憶的影響。
　　結(jié)果:在各組小鼠的痛域和焦慮狀態(tài)無明顯區(qū)別的情況下,THSG給藥可明顯增強小鼠的情景性條件恐懼的記憶能力,呈劑量依賴性變化。新物體認知實驗發(fā)現(xiàn), THSG給藥組動物對新物體的探索時間和探索頻率均明顯高于對照組,且呈劑量依賴性增加。腦片場電位記錄結(jié)

4、果顯示,相對于生理鹽水對照組,THSG明顯易化小鼠海馬區(qū)長時程增強(long-term potentiation,LTP),且呈劑量依賴性改變。
　　結(jié)論:慢性灌胃給予THSG可明顯增強小鼠海馬區(qū)LTP和學習記憶能力。
　　第二部分二苯乙烯苷增強小鼠海馬依賴性學習記憶的機制
　　目的:THSG對學習記憶的增強作用已在細胞和動物水平上得到證實,其機制研究雖略有涉及,但并不深入。近來研究表明,micro Ribonucle

5、ic Acid(miRNA)在學習記憶和神經(jīng)精神精神疾病中發(fā)揮重要作用。THSG能顯著影響小鼠的學習記憶行為,是否也與其調(diào)節(jié)miRNA有關(guān)呢?本實驗旨在從學習記憶相關(guān)的蛋白激酶和基因水平研究并確定 THSG促進學習記憶的作用靶點,進一步探討 THSG改善認知功能的機制,為THSG作為促智藥應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
　　方法:通過 western bloting及real-time qantitative polymerase chain

6、 reaction(real-time qPCR)技術(shù),觀察慢性灌胃給予THSG對小鼠海馬區(qū)蛋白表達及miR-134表達的影響;通過高爾基染色觀察其對海馬區(qū)樹突棘密度的影響。
　　結(jié)果:Western bloting結(jié)果顯示,與生理鹽水對照組相比,THSG明顯增加海馬沉默信息調(diào)節(jié)因子類型1(silent information regulator type1,SIRT1)的表達。Real-time qPCR檢測發(fā)現(xiàn)給藥組miR-1

7、34的表達明顯低于對照組,且與SIRT1表達呈負相關(guān)。此外,THSG給藥組的磷酸化 cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(phospho-cAMP response element binding protein,p-CREB)和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表達均增加;磷酸化細胞外信號激酶( phospho-extracellular signal-regulated kin

8、ases, p-ERK)和磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白激酶(phospho-calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,p-CaMKⅡ)的表達亦增加。高爾基染色結(jié)果顯示,THSG組小鼠海馬區(qū)樹突棘密度明顯增加。
　　結(jié)論:THSG可促進SIRT1的表達,抑制miR-134表達,另外,THSG也能激活ERK和CaMKII,并進一步激活CREB,增加BDNF的表達,從而增強學習記憶能力。高爾基染色