EPO對宮內感染腦白質損傷早產大鼠腦組織CD68、GFAP水平和神經行為學的影響.pdf

1、目的:通過檢測腦組織內CD68、神經膠質原纖維酸性蛋白(GFAP)水平的變化及評估神經行為學研究重組促紅細胞生成素(rhEPO)對宮內感染導致腦白質損傷早產鼠的神經保護作用。
　　方法:選取20只孕15天的Wistar大鼠，按3∶1比例隨機分為感染組(n=15)和對照組(n=5)，兩組分別于孕15天腹腔注射脂多糖(LPS0.3mg/Kg)及等量的無菌生理鹽水，于孕21天行剖宮產術取出胎鼠。兩組分別隨機取胎盤(n=10)和新生鼠腦組

2、織(n=10)予蘇木素-伊紅染色觀察病理變化。同時隨機選取對照組中新生鼠40只為早產對照組;選取感染組中新生鼠80只，隨機分為EPO治療組(n=40)和感染對照組(n=40)。EPO治療組于生后即刻腹腔注射rhEPO(5000IU/Kg)，早產對照組及感染對照組同時腹腔注射等量生理鹽水。三組新生大鼠均分別于生后1天、3天、7天各取10只仔鼠行甲醛灌注取腦，利用免疫熒光染色檢測腦組織中CD68和GFAP的水平;三組均于生后30天，各取10

3、只仔鼠利用曠場試驗、懸吊試驗、斜坡試驗、拒俘反應試驗進行神經行為學觀察。
　　結果:1.感染組孕鼠的胎盤血管充血、水腫，并可見大量中性粒細胞浸潤。感染組中新生鼠的腦白質染色淡、結構疏松;神經纖維粗細不均，走向紊亂，可見核小、體積小、深染及少突起的欠分化神經元;膠質細胞數(shù)量增多，可見細胞核固縮、胞漿疏松、細胞皺縮等凋亡改變。
　　2.三組新生1日齡大鼠腦組織未見明顯CD68、GFAP陽性染色;感染對照組及EPO治療組兩組3日齡

4、、7日齡大鼠腦組織中CD68、GFAP水平較早產對照組均顯著上升，各組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); EPO治療組3日齡、7日齡大鼠腦組織的CD68、6FAP水平較感染對照組均顯著下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。EPO治療組7日齡大鼠腦組織的CD68、GFAP較3日齡的水平顯著下降，感染對照組7日齡大鼠腦組織的CD68、GFAP較3日齡的水平有所上升，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3.神經行為測試

5、:感染對照組30日齡的大鼠神經行為學評分顯著低于早產對照組;EPO治療組的大鼠神經行為學評分明顯高于感染對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論:1.孕鼠腹腔注射LPS可以成功建立早產腦白質損傷大鼠模型。
　　2.新生早產大鼠早期應用rhEPO能夠減輕宮內感染早產大鼠腦白質損傷的炎癥反應及星形膠質細胞反應性增生，對宮內感染后的早產大鼠腦白質損傷有一定的治療作用。
　　3.早期應用rhEPO可以改善宮內感