卷柏總黃酮對代謝綜合征大鼠的干預作用及其安全性評價.pdf

1、　　目的 研究卷柏總黃酮對代謝綜合征的干預作用及其急性毒性和長期毒性。
　　方法 卷柏總黃酮對代謝綜合征大鼠糖脂代謝的影響及蛋白組學研究：雄性SD大鼠以高糖高脂飼料喂養(yǎng),8周后以50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg卷柏總黃酮連續(xù)給藥12周,觀察卷柏總黃酮對代謝綜合征大鼠血糖、血脂水平及對胰島素和胰高血糖素調節(jié)的影響,提取大鼠肝臟蛋白并進行雙向聚丙烯胺凝膠電泳分離,獲得了分辨率高、重復性好的雙向電泳圖譜。通過 PD

2、Quest 軟件分別比較了正常組、模型組和給藥組蛋白質凝膠電泳圖譜的變化,確定了豐度發(fā)生兩倍以上變化的差異表達蛋白點,經(jīng)質譜分析和蛋白數(shù)據(jù)庫搜索,獲得差異蛋白點鑒定結果。
　　急性毒性實驗：參照藥物研究技術指導原則[1]對中藥急性毒性實驗的技術要求,將小鼠隨機分為2組,給藥組以8g·kg-1灌胃給予卷柏總黃酮,間隔6小時后再次給予同樣劑量,空白對照組以相同的給藥方法給予蒸餾水。測試一日內(nèi)大劑量給藥小鼠的毒性反應和死亡情況,并于

3、給藥7天后解剖測量體重、臟器指數(shù),并觀察臟器組織變化。
　　長期毒性實驗：參照藥物研究技術指導原則對中藥長期毒性實驗的技術要求,將大鼠隨機分為4組,其中高、中、低劑量組分別以3g·kg-1、0.5g·kg-1、0.1g·kg-1連續(xù)灌胃給予卷柏總黃酮,空白對照組給予同體積蒸餾水。測定給藥三個月、六個月及停藥一個月大鼠的體重、血液學指標、血液生化學指標、臟器指數(shù)并進行組織病理學觀察。
　　結果 卷柏總黃酮對代謝綜合征大

4、鼠糖脂代謝的影響及蛋白組學研究：給藥后,卷柏總黃酮各劑量組均能降低代謝綜合征大鼠的空腹血糖和血脂水平,并提升口服葡萄糖耐量,胰島素、C-肽均有升高,胰高血糖素顯著性降低。利用雙向電泳技術,獲得了293個蛋白點,選取其中5個蛋白點做比對, 發(fā)現(xiàn)模型組與正常組相比有2個基因表達產(chǎn)物呈現(xiàn)明顯降低趨勢、給藥組與模型組相比有3個呈現(xiàn)明顯增加的趨勢,經(jīng)質譜分析和蛋白數(shù)據(jù)庫搜索,獲得了1個差異表達蛋白點鑒定結果,確定該蛋白為肌動蛋白。
　　

5、急性毒性實驗：小鼠一日內(nèi)給藥量為16g/kg,灌胃后小鼠未見死亡,7天后解剖主要臟器未見明顯病理改變；主要臟器指數(shù)與對照組比較無顯著性差異。
　　長期毒性實驗：大鼠給藥三個月、六個月、停藥一個月主要血液學指標、主要生化學指標與空白對照組比較無顯著性差異( P>0. 05) ,解剖主要臟器未見明顯病理改變,觀察組織切片無明顯異常；主要臟器指數(shù)與對照組比較無顯著性差異。
　　結論 卷柏總黃酮對代謝綜合征所表現(xiàn)的糖脂代謝異

6、常均有改善,對糖耐量特別是餐后血糖具有較好的控制作用。其作用可能與調節(jié)胰島素和胰高血糖素分泌而間接實現(xiàn)的。利用雙向電泳技術,獲得了 293個蛋白點,通過比對其中5個蛋白點,經(jīng)質譜檢測確定了其中一個差異蛋白為肌動蛋白。
　　卷柏總黃酮單次大劑量口服對機體無明顯毒性,其最大給藥量為16g/kg。根據(jù)提取率換算相當于 1776g/kg.
　　卷柏總黃酮長期服用對機體無明顯毒性,日常行為活動無影響,對機體的肝腎功能、造血功能