DLC-1和p130Cas在卵巢上皮性癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、背景與目的
　　 卵巢腫瘤是女性生殖系統(tǒng)常見的腫瘤之一,在女性惡性腫瘤中卵巢癌的死亡率高達(dá)5％。由于卵巢惡性腫瘤早期就診率極低、容易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移等特點(diǎn),近些年來雖然外科手術(shù)聯(lián)合一線化療藥物紫杉醇的應(yīng)用,以及開展腹腔化療等治療方法,卵巢癌總的五年生存率仍在37％-46％,長期生存率并未得到明顯改善。卵巢惡性腫瘤已成為嚴(yán)重威脅婦女生命和健康的主要腫瘤,所以研究卵巢癌的分子生物學(xué)發(fā)病機(jī)制,尋找能早期診斷以及判斷預(yù)后的相關(guān)因子,是目前卵巢

2、癌研究的重點(diǎn)。肝癌缺失基因-1(deleted in liver cancer,DLC-1)為新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,在正常組織中調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架、影響細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),在惡性腫瘤中則抑制腫瘤細(xì)胞的生長、增殖和浸潤轉(zhuǎn)移。p130Crk相關(guān)底物(Crk-associatcd substrate130kDa,p130Cas)是局部黏著斑蛋白,在細(xì)胞信號網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮支架分子的作用,對于惡性腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,尤其是侵襲和轉(zhuǎn)移發(fā)揮重要的作用。目前關(guān)于兩者在卵巢上皮性

3、癌中的共同檢測國內(nèi)外報(bào)道很少。
　　 本研究采用免疫組織化學(xué)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)的方法分別檢測在卵巢上皮性癌組織和正常卵巢組織中DLC-1和p130Cas的表達(dá)情況,分析DLC-1和p130Cas與卵巢上皮性癌各臨床病理特征之間的關(guān)系以及兩者之間的相關(guān)性,探討兩者在卵巢上皮性癌發(fā)生發(fā)展中的作用,進(jìn)一步揭示卵巢上皮性癌可能

4、的分子生物學(xué)發(fā)病機(jī)制。材料與方法
　　 選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科2007年1月至2008年10月行手術(shù)治療的患者44例,包括32例卵巢上皮性癌組織,12例正常卵巢組織取自因子宮肌瘤而同時(shí)行卵巢切除的患者。同時(shí)選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2006-2007年婦科手術(shù)存檔蠟塊40例,其中30例卵巢上皮性癌組織,10例正常卵巢組織來源于因子宮肌瘤而同時(shí)行卵巢切除的患者。
　　 1采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測在62例卵巢上皮

5、性癌組織和22例正常卵巢組織中DLC-1和p130Cas蛋白表達(dá)情況以及與卵巢上皮性癌各臨床病理特征之間的關(guān)系,分析DLC-1和p130Cas在蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性。
　　 2采用RT-PCR方法檢測32例卵巢上皮性癌組織和12例正常卵巢組織中DLC-1和p130Cas的基因表達(dá)情況,分析兩者基因表達(dá)與卵巢上皮性癌各臨床病理特征之間的關(guān)系,同時(shí)分析DLC-1和p130Cas在基因表達(dá)之間的相關(guān)性。
　　 3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:數(shù)

6、據(jù)結(jié)果均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)和單因素方差分析,相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson積差相關(guān)分析；計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman等級相關(guān)分析；以雙側(cè)α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1 DLC-1蛋白在卵巢上皮性癌組織和正常卵巢組織中的陽性表達(dá)率分別為54.8％(34/62)和100.0％(22/22),p130Cas蛋白在卵巢上皮性癌組織和正常卵巢

7、組織中的陽性表達(dá)率分別為87.1％(54/62)和31.8％(7/22),運(yùn)用x2檢驗(yàn),兩者在卵巢上皮性癌組織中蛋白陽性表達(dá)率與正常卵巢組織相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=14.903,P<0.05；x2=24.955,P<0.05)。
　　 2 DLC-1蛋白與卵巢上皮性癌組織FIGO分期(x2=4.846,P<0.05),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(x2=5.939,P<0.05)和腹水形成(x2=6.074,P<0.05)有關(guān),而與其余因

8、素?zé)o關(guān)。p130Cas蛋白在卵巢上皮性癌組織FIGO分期(x2=7.679,P<0.05)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。(x2=4.032,P<0.05)有關(guān),而與其余因素?zé)o關(guān)。
　　 3卵巢上皮性癌組織中DLC-1mRNA和p130CasmRNA的相對表達(dá)量分別為0.30±0.11,1.01±0.05,正常卵巢組織中兩者的相對表達(dá)量分別為0.68±0.17,0.29±0.08,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-3.284,P<0.05；t=27.19

9、6,P<0.05)。
　　 4 DLC-1mRNA在晚期卵巢上皮性癌(Ⅲ期-Ⅳ期)的表達(dá)強(qiáng)度明顯低于早期卵巢上皮性癌(Ⅰ-Ⅱ期),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.156,P<0.05)。DLC-1mRNA在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和腹水形成組的表達(dá)強(qiáng)度明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無腹水形成組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.944,P<0.05；t=2.470,P<0.05),而與患者的年齡、組織學(xué)分級和組織學(xué)類型無關(guān)(P>0.05)。p130CasmR

10、NA在晚期卵巢上皮性癌(Ⅲ-Ⅳ期)的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于早期卵巢上皮性癌(Ⅰ期-Ⅱ期),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-2.404,P<0.05)。p130CasmRNA在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-2.507,P<0.05),而與其他臨床病理特征無關(guān)(P>0.05)。
　　 5卵巢上皮性癌組織中DLC-1和p130Cas蛋白表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.330,P<0.05),DLC-1mRNA和

11、p130CasmRNA表達(dá)水平之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.375,P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1 DLC-1在卵巢上皮性癌組織中表達(dá)降低,且在臨床分期晚、有腹水形成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢上皮性癌組織中表達(dá)降低,提示DLC-1可能與卵巢上皮性癌的發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
　　 2 p130Cas在卵巢上皮性癌組織中表達(dá)增高,且在臨床分期晚、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢上皮性癌組織中表達(dá)增高,提示p130Cas可能與卵巢上