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文檔簡介
1、目的:
檢測Tbx2、Tbx3蛋白在肝癌細胞和肝細胞中表達,探討Tbx2、Tbx3蛋白在肝細胞癌變過程中的變化。
方法
(1)臨床收集新鮮原發(fā)性肝癌標本及同體肝組織標本32例.常規(guī)福爾馬林浸泡后,行石蠟包埋,切片常規(guī)HE染色后確診視野內(nèi)細胞性質(zhì)后,選取診斷明確的肝癌切片行免疫組織化學(xué)檢測。
(2)免疫組化試劑盒外購:羊抗人Tbx2、Tbx3多克隆抗體購自Santra cruz公司;
2、SP免疫組化試劑盒購自北京中山生物技術(shù)公司。
(3)免疫組化染色后中性樹膠封片,在顯微鏡下觀察實驗結(jié)果,并選取有效區(qū)域攝片。
(4)以胞漿和胞核著色判斷為陽性,根據(jù)陽性細胞數(shù)和著色強度進行半定量分析:無陽性細胞,計0分;陽性細胞數(shù)1%~30%,計1分;31%~70%,計2分;71%~100%,計3分。然后根據(jù)陽性著色強度依次計0、1、2、3分(不著色為0分,淺棕色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分)。每張切片
3、的兩項分數(shù)累計,0分為陰性(-),1、2分為弱陽性(+),3、4分為陽性(++),5、6分為強陽性(+++)。
(5)臨床采集大腸癌、胰腺癌、正常胰腺組織同法行免疫組化染色,與相關(guān)文獻比較。
結(jié)果
(1)肝癌細胞及未癌變肝細胞中均有Tbx2、Tbx3蛋白的表達。
(2)Tbx2在肝癌細胞中的強陽性表達為0%,在未癌變肝細胞中表達強陽性率為87.5%,統(tǒng)計學(xué)處理x2檢驗示:Tbx2在
4、癌組織和正常組織中的表達比較差異有顯著性(P<0.01),兩者有明顯差異性。
(3)Tbx3在肝癌細胞中的強陽性表達為0%,在未癌變肝細胞中強陽性表達率為90.6%,統(tǒng)計學(xué)處理x2檢驗示:Tbx3在癌組織和正常組織中的表達比較差異有顯著性(P<0.01),兩者有明顯差異性。
(4)肝癌細胞中表達均弱于同體肝細胞的表達,均為弱陽性,在各分化類型中無明顯區(qū)別。
(5)大腸癌、胰腺癌、正常胰腺組織的免
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