糖尿病大鼠腎臟中CB、CC表達(dá)變化及蟲(chóng)草菌粉干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的：研究糖尿病腎?。―N）腎組織中組織蛋白酶B（CB）及其抑制因子胱抑素C（CC）隨病程進(jìn)展的變化情況，并探討蟲(chóng)草菌粉干預(yù)對(duì)CB、CC表達(dá)的影響。 方法：第一部分：將wistar大鼠分成正常組（N組n=30）和糖尿病組（M組 n=35），糖尿病組給予STZ55mg/kg腹腔內(nèi)注射，72小時(shí)后隨機(jī)血糖大于16．7 m mol/L為造模成功。兩組分別在第4、8、16周各處死10只大鼠，在處死前留取24小時(shí)尿液測(cè)24h尿蛋白定量，留

2、取血清標(biāo)本測(cè)血肌酐，留取腎臟標(biāo)本進(jìn)行免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)CC，CB，CollV，F(xiàn)N的表達(dá)情況。第二部分：將100只健康 wistar大鼠隨機(jī)分成正常組（N組 n=30）和糖尿病組（n=70），糖尿病組造模方法同第一部分，成模后隨機(jī)分為模型組（M組 n=30）和治療組（T組n=30）。并在第4、8、16周每組各處死10只大鼠，處死前留取24h尿和血標(biāo)本用以測(cè)24尿白蛋白、尿肌酐和血肌酐，留取腎臟標(biāo)本用免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PC

3、R檢測(cè)。 結(jié)果：N大鼠腎組織中CC、CB、coIIV、FN的表達(dá)隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)并沒(méi)有出現(xiàn)明顯的變化； CB在DN早期表達(dá)增加，隨著病程的進(jìn)展，病情的加重，其表達(dá)量下降；CoIIV、FN隨著病程的進(jìn)展表達(dá)逐漸增加；24h尿蛋白定量逐漸增加。第8周M組大鼠內(nèi)生肌酐清除率和24h尿蛋白較第4周顯著上調(diào)，免疫組化和PCR結(jié)果顯示CB、CC、CoIIV、FN表達(dá)上調(diào)。第16周時(shí)CB表達(dá)下調(diào)，而CC顯著上調(diào)。相關(guān)分析顯示CB的表達(dá)與24

4、小時(shí)尿蛋白、CoIIV、FN蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。 蟲(chóng)草菌粉干預(yù)治療后，對(duì)各組大鼠的血糖水平影響不明顯，但能延緩DN大鼠腎重和腎重指數(shù)的增加，延緩DN大鼠體重的下降。在干預(yù)的前4周，CB、CC、CoIIV、FN在N、M、T的表達(dá)無(wú)明顯的差異，當(dāng)干預(yù)到第8周后，各指標(biāo)才出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變化。較 N組，M和 T組大鼠內(nèi)生肌酐清除率和24h尿蛋白第4周開(kāi)始升高，免疫組化和PCR結(jié)果顯示CB、CC、CoIIV、FN表達(dá)在第8

5、周出現(xiàn)明顯上調(diào)，M組CB在16周下調(diào)；T組的CB、CC、CoIIV，F(xiàn)N在前8周較M組無(wú)顯著變化，CC、CoIIV、FN第16周表達(dá)下調(diào)，CB的表達(dá)上調(diào)。 結(jié)論：DN大鼠早期出現(xiàn)尿蛋白排泄量增加，內(nèi)生肌酐清除率增加；隨著病程的進(jìn)展，ECM蓄積增加，DN大鼠腎臟的病理改變腎小球基底膜彌漫變厚腎小球系膜基質(zhì)增多，最終形成小球硬化和纖維化；CC表達(dá)增加，使CB的表達(dá)減少，使ECM的降解減少，這是引起DN腎臟病理改變的主要原因之一。