乙型肝炎病毒X蛋白對小鼠足細(xì)胞補體調(diào)節(jié)蛋白CD59和Crry表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白（HBx）對體外培養(yǎng)的小鼠足細(xì)胞補體調(diào)節(jié)蛋白CD59和Crry表達(dá)的影響。
　　 方法：培養(yǎng)的小鼠足細(xì)胞分為乙型肝炎病毒（HBV）X基因轉(zhuǎn)染組（Ad-X）、空白足細(xì)胞組（B）和腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組（Ad），PT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)檢測HBVX基因轉(zhuǎn)染對CD59和Crry基因和蛋白的表達(dá)，MTT法檢測其對補體激活的影響；觀察ERK1/2、P38MAPK、PI-3K通路抑制劑對足細(xì)胞CD59和Cr

2、ry表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：與空白足細(xì)胞組（B）相比，腺病毒空載體組（Ad）對小鼠足細(xì)胞CD59和Crry的基因和蛋白表達(dá)無顯著影響（P值均>0.05），轉(zhuǎn)染HBVX基因組（Ad-X）CD59在蛋白表達(dá)水平上顯著高于B組（P<0.005）和Ad組（P<0.005）,在基因表達(dá)水平上也明顯高于B組（P<0.05）和Ad組（P<0.05）。Ad-X組Crry在蛋白表達(dá)水平上顯著高于B組（P<0.005）和Ad組（P<0.005）,

3、在基因表達(dá)水平上也明顯高于B組（P<0.05）和Ad組（P<0.05）。通路抑制劑加入Ad-X組后，SB203580組與無抑制劑的Ad-X組比較，CD59蛋白表達(dá)明顯降低（P＜0.01)，Crry蛋白表達(dá)也明顯降低（P＜0.01)。LY294002組、U0126組、DMSO組與無抑制劑的Ad-X組比較CD59和Crry蛋白的表達(dá)無顯著差異（P值均>0.05）。MTT法提示在各個血清稀釋點上，Ad-X組細(xì)胞裂解抑制率均明顯高于B組和Ad組