山楂總黃酮提取工藝、提取物活性及指紋圖譜研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山楂為薔薇科植物,是一種重要的藥食兩用資源,在我國種植栽培面積廣闊,產(chǎn)量可觀?,F(xiàn)代研究證實,山楂具有抗動脈粥樣硬化,降血壓,降血脂,增加冠脈血流量,抗氧化,防癌、抗癌,以及提高機(jī)體免疫力等生理活性,研究表明,這些生理活性與山楂中所含的黃酮、原花青素以及三萜酸等活性成分有關(guān)。但現(xiàn)有研究主要停留在一些簡單的提取工藝及粗提物的加工上,這極大的影響了山楂及其活性成分的有效利用。為此,本研究構(gòu)建了山楂總黃酮的分析方法;將超臨界CO<,2>萃取新技

2、術(shù)應(yīng)用于山楂活性成分的提取中并優(yōu)化了山楂總黃酮提取工藝,對各種提取物抗氧化功能進(jìn)行了比較研究;結(jié)合HPLC-DAD-MS聯(lián)用技術(shù)系統(tǒng)研究了山楂活性成分的指紋圖譜,以期有效控制山楂藥材質(zhì)量。主要研究概述如下: 1.將改進(jìn)后的聚酰胺吸附與NaNO<,2>-AI(NO<,3>)<,3>比色法用于山楂總黃酮測定,減少了雜質(zhì)的干擾,并且優(yōu)化了顯色時間,結(jié)果表明該方法精密度高,重現(xiàn)性好,顯色穩(wěn)定,加樣回收率高,該方法能更準(zhǔn)確的測定山楂總黃酮

3、的含量。 2.采用乙醇回流法提取山楂總黃酮,以測得山楂樣品中總黃酮含量為指標(biāo),選用正交表L<,9>(3<'4>)對山楂總黃酮提取工藝進(jìn)行研究。試驗結(jié)果表明:最佳提取條件為用70%乙醇,固液比為1:20,在70℃下提取2h,重復(fù)提取2次,此時總黃酮得率為3.97%。 3.研究了超臨界CO<,2>萃取技術(shù)提取山楂總黃酮的最佳工藝。通過考察萃取壓力、萃取溫度和萃取次數(shù)等影響因素,運(yùn)用中心組合試驗設(shè)計和響應(yīng)面分析法分析得到最佳的

4、萃取工藝條件為:萃取壓力36.6Mpa,萃取溫度47.8℃,萃取4次(40mL95%乙醇夾帶劑,萃取2h),最優(yōu)工藝條件下的總黃酮得率為0.59%。 4.通過研究山楂不同提取物對DPPH自由基和O<,2><'->·自由基的清除作用考察其抗氧化活性。結(jié)果表明,山楂各種不同提取方法獲得的山楂提取物均有抗氧化活性,不同提取物抗氧化活性強(qiáng)弱為:醇提物>超臨界CO<,2>萃取物>水提物,提取物量與抗氧化活性呈正相關(guān)。通過測定山楂提取物乙酸

5、乙酯、正丁醇和萃余物三個萃取部分清除DPPH·自由基的能力,發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯萃取部分清除DPPH·自由基能力和抗氧化活性最強(qiáng)。 5.建立了不同山楂樣品的HPLC指紋圖譜,并采用HPLC-DAD-MS聯(lián)用技術(shù)獲得了指紋圖譜的多維信息,參照現(xiàn)有文獻(xiàn),對指紋圖譜中的主要色譜峰進(jìn)行了結(jié)構(gòu)歸屬的初步判斷,鑒定了7個共有峰。對色譜指紋圖譜進(jìn)行相似度計算,獲得了令人滿意的結(jié)果,并生成了對照指紋圖譜,該法為山楂樣品的鑒定提供了較全面的信息,有助于提

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