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1、目的:通過(guò)觀察選擇性COX-1抑制劑對(duì)切口痛大鼠術(shù)后機(jī)械痛行為及背根神經(jīng)節(jié)Asic3表達(dá)的影響,探討選擇性COX-1抑制劑與DRG Asic3在術(shù)后痛中的作用。
方法:本實(shí)驗(yàn)采用Brennan經(jīng)典左足切口痛模型。選用SPF級(jí)雄性SD大鼠,體重220g-260g。實(shí)驗(yàn)一:雄性SD大鼠隨機(jī)分為三組(n=6):切口痛組(N組):僅行左足底切口手術(shù)操作即切口痛模型的建立;切口痛+DMSO組(N+D組):建立切口痛模型前鞘內(nèi)注射二甲基亞
2、砜(DMSO)10μl;切口痛+SC560組(N+S組):建立切口痛模型前鞘內(nèi)注射由10μl DMSO溶解的選擇性COX-1抑制劑SC560100μg。在術(shù)前及術(shù)后2、4、12、24、48小時(shí),用VonFrey纖維細(xì)絲測(cè)定三組大鼠機(jī)械縮足閾值(mechanical withdrawal threshold,MWT)。實(shí)驗(yàn)二:雄性SD大鼠隨機(jī)分為與實(shí)驗(yàn)一相同的三組(n=16):N組、N+D組、N+S組,三組大鼠每組又分為兩個(gè)亞組即West
3、ern Blot組(n=10)與免疫熒光組(n=6),在實(shí)驗(yàn)一觀察到的SC560藥物作用時(shí)間點(diǎn)即術(shù)后24小時(shí)將三組大鼠處死取材,分別采用Western blot技術(shù)與免疫熒光技術(shù)檢測(cè)三組大鼠DRG Asic3的表達(dá)。
結(jié)果:1.N組大鼠術(shù)后24、48小時(shí)MWT值明顯低于術(shù)前、術(shù)后2、4、12小時(shí)(P<0.05),N組術(shù)后24小時(shí)與48小時(shí)MWT值比較(P>0.05),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;N組與N+D組在術(shù)前、術(shù)后2、4、12、2
4、4、48小時(shí)MWT值兩組間比較(P>0.05),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;N組與N+S組在術(shù)前、術(shù)后2、4、12、24、48小時(shí)MWT值兩組間比較,在術(shù)后24小時(shí),N+S組大鼠MWT值明顯高于N組(P<0.05)。2.術(shù)后24小時(shí),N+S組大鼠DRG Asic3蛋白表達(dá)明顯低于N組(P<0.01),N+D組與N組比較(P>0.05),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.大鼠DRG Asic3陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)記顯示為綠色熒光,主要表達(dá)在細(xì)胞膜上。術(shù)后24小時(shí),N+S
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