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文檔簡介
1、目的:觀察普羅布考在ox-LDL誘導THP-1巨噬細胞凋亡過程中對Daxx、CD36、Caveolin-1、ABCA1、Caspase3表達的影響,初步探討普羅布考抗ox-LDL誘導THP-1巨噬細胞凋亡的機制?! 》椒ǎ毫魇郊毎g檢測細胞凋亡率;吖啶橙(AO)熒光染色觀察細胞核形態(tài)。RT-PCR、間接免疫熒光法分別檢測Daxx、Caveolin-1、CD36、ABCA1、Caspase3mRNA和蛋白質的表達。Westernblot
2、檢測Daxx蛋白質的表達。檢測細胞內丙二醛硫代巴比妥酸反應物(TBARS)含量反映過氧化脂質的水平?! 〗Y果:100μg/mLox-LDL誘導THP-1巨噬細胞凋亡率時序增加;ox-LDL孵育細胞48小時后,細胞出現(xiàn)核濃縮、碎裂、凋亡小體等凋亡特征;Daxx、Caveolin-1、CD36、ABCA1的表達增高。用50μmol/L普羅布考預處理細胞4小時,再用100μg/mLox-LDL孵育48小時后,細胞凋亡率由8.56±0.23%
3、下降至3.86±1.14%;Daxx、Caspase3mRNA和蛋白質水平下調,Caveolin-1、ABCA1mRNA水平無明顯改變,蛋白質表達下調,而CD36的表達沒有改變。細胞內TBARS含量由9.37±0.21下降至4.16±0.13nmol/mgprotein?! 〗Y論:1.普羅布考通過下調Daxx、Caspase3蛋白質的表達,抑制ox-LDL誘導THP-1巨噬細胞凋亡。2.普羅布考抗凋亡作用與普羅布考降低細胞內氧化脂質含
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