我國(guó)部分地區(qū)傳染性法氏囊病分子流行病學(xué)研究.pdf

1、本研究針對(duì)近年來(lái)我國(guó)雞傳染性法氏囊病防制過(guò)程中出現(xiàn)的免疫失敗現(xiàn)象，對(duì)該病的分子流行病學(xué)進(jìn)行了研究。從我國(guó)11個(gè)省(市、自治區(qū))采集法氏囊病料68份，分離鑒定雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)21株。運(yùn)用RT-PCR方法對(duì)VP2基因進(jìn)行了擴(kuò)增、測(cè)序、序列分析和遺傳進(jìn)化分析，結(jié)果表明：除SH-h株外，其余20株均具有IBDV超強(qiáng)毒株的分子特征，即222A、256I、294I和299S。核苷酸同源性比較表明：分離毒株與歐洲超強(qiáng)毒株UK661和我

2、國(guó)超強(qiáng)毒株Gx株核苷酸同源率均在97.5％～99.4％；推導(dǎo)氨基酸同源在98.9％～100％。 分離毒株間核苷酸同源率在96.7％～99.9％；推導(dǎo)氨基酸的同源率在98.2％～100％。以UK661為參考毒株，對(duì)分離毒株第一親水區(qū)和第二親水區(qū)推導(dǎo)氨基酸比較發(fā)現(xiàn)：SH-h株在222位發(fā)生A→P替換；HLJ-1、HLJ-2、HLJ-3和HLJ-4在第一親水區(qū)的212位發(fā)生D→N替換，HLJ-3和HLJ-4株在第二親水區(qū)321位氨基酸

3、發(fā)生A→V替換，且血清I型IBDV均起源于同一祖先序列，所有分離毒株均位于vvIBDV進(jìn)化群內(nèi)。遺傳距離表明：進(jìn)化順序?yàn)榻?jīng)典毒株、變異株，最后出現(xiàn)的是vvIBDV。 以7株抗IBDVVP2單克隆抗體介導(dǎo)的間接ELISA方法對(duì)Gx、HLJ-2株和HLJ-4株3株病毒的抗原性進(jìn)行分析，結(jié)果表明：HLJ-2、HLJ-4和Gx在抗原上存在著一定差異。在此基礎(chǔ)上，用HLJ-4株和Gx株對(duì)傳染性法氏囊活疫苗(Gt株)的免疫保護(hù)力進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)

4、果表明：傳染性法氏囊活疫苗(Gt株)免疫SPF雞群能抵抗超強(qiáng)毒株Gx和HLJ-4的攻擊，SPF雞保護(hù)率達(dá)100％。 從山東、甘肅、江蘇和遼寧等地的7個(gè)雞場(chǎng)采集349份血清，對(duì)禽類三種重要的能引起免疫抑制的病毒(CAV、ALV-J和REV)進(jìn)行了血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示：CAV的血清陽(yáng)性率高達(dá)81.4％，表明CAV在我國(guó)的一些雞場(chǎng)普遍存在。為進(jìn)一步研究CAV感染對(duì)傳染性法氏囊病疫苗的影響，將80羽1日齡SPF雛雞隨機(jī)分為5組，即Gx攻

5、毒對(duì)照組(A組)、感染組(B組)、Gt株免疫組(C)、感染-法氏囊活株疫苗(Gt株)免疫組(D組)和空白對(duì)照組(E組)，每組16羽，B組和D組在1日齡人工肌注感染病毒CAV-M9905株；7日齡，用雞傳染性法氏囊病活疫苗(Gt株)口服免疫C組和D組雛雞；14日齡、20日齡和28日齡翅靜脈采集分離血清，用ELISA試劑盒檢測(cè)IBDV抗體水平，在28日齡對(duì)A、B、C和D組通過(guò)滴鼻點(diǎn)、點(diǎn)眼途徑攻IBDV超強(qiáng)毒株Gx(ELD50=102.72/