高糖環(huán)境下HGF對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及c-met mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究高糖對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC304)增殖及HGFmRNA表達(dá)的影響及高糖環(huán)境下HGF對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及c-metmRNA表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步探討糖尿病心血管并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)理和HGF對(duì)糖尿病心血管并發(fā)癥的治療作用。 方法：體外培養(yǎng)EC304。細(xì)胞分別培養(yǎng)于不同的條件培養(yǎng)基中，采用MTT方法檢測不同濃度的高糖在不同的作用時(shí)間對(duì)EC304增殖的影響及高糖環(huán)境下HGF在不同的作用時(shí)間對(duì)EC304增殖的影響；逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反

2、應(yīng)(RT-PCR)方法分析高糖在不同的作用時(shí)間對(duì)HGFmRNA表達(dá)水平的影響，高糖及高糖環(huán)境下HGF在不同的作用時(shí)間對(duì)c-metmRNA表達(dá)水平的影響。 結(jié)果：EC304在高糖的誘導(dǎo)作用下，6h時(shí)各組細(xì)胞增殖能力無明顯差別，但隨著作用時(shí)間的延長，作用12h時(shí)，細(xì)胞增殖較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，且隨著高糖濃度的增加，細(xì)胞增殖明顯增強(qiáng)，細(xì)胞增殖致24h達(dá)高峰，48h細(xì)胞增殖被抑制，細(xì)胞數(shù)量較24h明顯減少，出現(xiàn)抑制細(xì)胞增殖的現(xiàn)象，96h時(shí)細(xì)

3、胞的數(shù)量進(jìn)一步減少，且呈濃度依賴性。HGF組與高糖組相比，6h和12h無明顯差別，作用24h、48h、96h時(shí)HGF組細(xì)胞增殖旺盛。作用6h，高糖組HGFmRNA的表達(dá)與對(duì)照組無明顯差別，作用12h，高糖組HGFmRNA的表達(dá)較對(duì)照組升高，作用24h，HGFmRNA的表達(dá)開始降低，隨著作用時(shí)間的延長，HGFmRNA的表達(dá)逐漸降低，即高糖降低HGFmRNA的表達(dá)。作用6h各組c-metmRNA的表達(dá)之間無顯著差別，作用12h，高糖組和HG

4、F組c-metmRNA的表達(dá)開始升高，較對(duì)照組明顯升高，一直持續(xù)到24h達(dá)高峰，而在48h和96h時(shí)高糖組較對(duì)照組和HGF組c-metmRNA表達(dá)明顯減少；HGF組同高糖組相比可明顯增加c-metmRNA的表達(dá)。 結(jié)論：高糖早期(6h)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、c-met和HGFmRNA的表達(dá)無明顯影響，高糖中期(12h、24h)促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、上調(diào)c-metmRNA的表達(dá)，HGFmRNA的表達(dá)12h達(dá)高峰，晚期(48h、96h