基于溫敏高分子材料的多組分化學發(fā)光檢測方法研究.pdf_第1頁
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1、復旦大學碩士學位論文基于溫敏高分子材料的多組分化學發(fā)光檢測方法研究姓名:周暘申請學位級別:碩士專業(yè):藥物分析指導教師:盧建忠20070501碩士論文?一一基于溫敏高分子材料的多組分化學發(fā)光檢測方法研究摘要多組分同時檢測定量是目前蛋白質(zhì)、基因序列等大分子化合物分析檢測的熱點,尤其是在臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。相對于單一組分分析,多組分同時分析測定具有樣品需求量少,分析時間短,重復步驟少,費用相對低等優(yōu)點,受到越來越多人的關(guān)注。近年來,該領(lǐng)

2、域的科學家主要著力于多標記的多組分檢測方法的發(fā)展,例如多種酶,金屬,熒光標記等。但是這些方法由于標記物有限,限制了多組分檢測方法的拓寬和發(fā)展。本文建立了基于溫敏高分子的多組分同時檢測分析的方法,突破了目前許多方法需要多種標記物的局限性,將高分子材料、磁珠、聚苯乙烯微球作為三種生物大分子載體。由于三者具備特殊的分離特性,既可以通過加熱離心分離,又可以通過磁場,常溫離心,加熱離心將三者分開,從而實現(xiàn)三組分同時檢測。并將該方法應用于蛋白質(zhì)、D

3、 N A 兩種生物大分子檢測中,實驗結(jié)果驗證了方法的可行性。( 1 ) 溫敏高分子材料的合成及性質(zhì)的探索;完成了蛋白質(zhì)、D N A 修飾的高分子材料合成,并考察了其對大分子物質(zhì)的非特異吸附性,驗證了多組分檢測的可行性。( 2 ) 建立了雙組分I g G 和l e a 同時檢測方法:利用高分子及磁珠的分離特性,成功地達到了單一標記同時檢測目的,且用靈敏度高的辣根過氧化氫酶( H R P ) 化學發(fā)光檢測,檢測靈敏度分別達到了2 .0n g

4、 /m l 和1 .5n g /r n l ??疾炝嗽摲椒ǖ奶靻柼靸?nèi)精密度,兩組分均具有1 1 %左右的重現(xiàn)性,與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫反應相當。我們將該方法應用于4 0 多個人體血清樣本中1 9 0 和I g A 的檢測,結(jié)果顯示該方法檢測結(jié)果與臨床檢驗結(jié)果相關(guān)性良好。( 3 ) 建立了三組分乙肝基因序列同時檢測方法:在雙組分成功檢測的基礎(chǔ)上。我們引入了聚苯乙烯微球,利用三種不同載體各自特性的差別實現(xiàn)了三組分同時檢測的目的。隨后采用鳥嘌呤特異

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