白細胞介素1及其受體在機械性腦損傷時的表達及意義.pdf

1、本實驗通過復制Marmarou's大鼠閉合性顱腦損傷模型，采用組織芯片及免疫組化技術，研究閉合性腦損傷后白介素1(IL-1)及其受體IL-1RI在腦組織中的表達部位、時序性特點及二者之間的相互關系。探討機械性腦損傷時的致傷機制，為機械性腦損傷的早期診斷和治療提供理論和實驗依據(jù)。 研究方法：采用清潔級SD大鼠60只，體重350-400g。隨機分為正常對照組、手術對照組及損傷后1h組、2h組、4h組、8h組、12h組、24h組、2d

2、組、3d組、5d組。 復制Marmarou's大鼠落體打擊損傷模型。進行4％多聚甲醛灌注固定、取材。HE、棓花青(Einarson氏)尼氏體染色法觀察損傷病理改變。用組織芯片儀制作組織芯片，SP法檢測腦組織皮質、海馬和腦干神經(jīng)細胞IL-1、IL-1RI的表達情況。采用Mias2000圖像分析系統(tǒng)采集并計算陽性組胞數(shù)。全部數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5forwindows分析軟件進行統(tǒng)計處理，以P＜0.05為顯著性差異的水準。

3、 研究結果： 1.病理學改變：損傷組可見硬膜下出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、側腦室出血，小挫傷灶。部分神經(jīng)細胞胞體固縮、深染、拉長，或呈三角形。細胞核小而深染，樹突深染，常呈波浪狀；部分神經(jīng)細胞胞體腫脹，胞漿變空，核淡染，核膜及核仁完整。腦細織水腫，腦干部分神經(jīng)纖維增粗、呈波浪狀改變。 2.IL-1免疫組織化學染色結果：對照組皮層、海馬、腦干部位均有少量陽性細胞表達。陽性物質呈棕黃色，定位于細胞漿和細胞核，胞漿著色較淡，核仁呈陰

4、性，部分細胞可見彎曲，螺旋狀樹突及軸突。損傷組皮層、海馬、腦干部位IL-1免疫反應陽性細胞數(shù)目增多，免疫陽性物質增加，膠質細胞呈強陽性表達。主要位于皮質打擊、對沖部位，海馬以CA3、CA4區(qū)及齒狀回表達明顯，CA2區(qū)表達較弱。腦干免疫反應陽性神經(jīng)細胞及膠質細胞增多。頂葉皮層IL-1免疫反應陽性細胞計數(shù)，損傷后30min表達開始增多，2h達最大值，然后逐漸降低。與對照組比較，損傷后30min-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷

5、后24h-5d組差別無顯著意義(p＞0.05)。海馬IL-1免疫反應陽性細胞計數(shù)，損傷后30min開始增多，損傷后2h達高峰，然后逐漸降低。與對照組比較，損傷后30min-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后24h-5d組差別無顯著意義(p＞0.05)。腦干IL-1免疫反應陽性細胞計數(shù)，損傷后30min開始增多，損傷后2h達高峰，然后逐漸降低。與對照組比較，損傷后30min-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后2

6、4h-5d組差別無顯著意義(p＞0.05)。 3.IL-1RI免疫組織化學染色結果：對照組皮層、海馬、腦干部位均有少量IL-1RI免疫反應陽性細胞表達。陽性物質呈棕黃色，定位于細胞漿和細胞核，胞漿著色較淡，核仁呈陰性。損傷組皮層、海馬、腦干部位IL-1RI免疫反應陽性細胞數(shù)目增多，免疫陽性物質增加，膠質細胞表達尤為明顯，呈強陽性表達。主要位于頂葉皮層、對沖部位，海馬CA3、CA4區(qū)及齒狀回表達明顯。腦干免疫反應陽性神經(jīng)細胞及膠質

7、細胞增多。頂葉皮層IL-1RI免疫反應陽性細胞計數(shù)，損傷后1h表達開始增多，4h達最大值，然后逐漸降低。與對照組比較，損傷后1h-12h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后24h-48h組與對照組比較時差別有顯著意義(p＜0.05)，損傷后72h-5d組與對照組比較差別無顯著意義(p＞0.05)。海馬IL-1RI免疫反應陽性細胞計數(shù)在損傷后1h開始增多，損傷后4h達高峰，然后逐漸降低。與對照組比較，損傷后1h-12h組差別有極顯著

8、意義(p＜0.01)，損傷后24h-5d組與對照組比較時差別無顯著意義(p＞0.05)。腦干IL-1RI免疫反應陽性細胞表達趨勢同頂葉皮層和海馬。免疫反應陽性細胞計數(shù)在損傷后1h開始增多，損傷后4h達高峰，然后逐漸降低。與對照組比較，損傷后1h-8h組差別有極顯著意義(p＜0.01)，損傷后12h組與對照組比較時差別有顯著意義(p＜0.05)，24h-5d組與對照組比較差別無顯著意義(p＞0.05)。 研究結論： 1.正

9、常時皮層、海馬、腦干部位均有少量IL-1免疫反應陽性細胞表達。腦損傷后皮層、海馬、腦干部位IL-1表達增強，免疫反應陽性細胞數(shù)目增多，損傷后30min皮層、海馬、腦干部位IL-1表達開始增強，2h達高峰，然后逐漸降低，損傷后24h-5d組IL-1表達接近正常。 2.正常時皮層、海馬、腦干部位均有少量IL-1RI免疫反應陽性細胞表達。腦損傷后皮層、海馬、腦干部位IL-1RI表達增強，免疫反應陽性細胞數(shù)目增多，損傷后1h皮層、海馬、