劍麻再生體系的構建和遺傳轉(zhuǎn)化體系的初步研究.pdf

1、劍麻是全球和我國熱區(qū)最重要的麻類經(jīng)濟作物，其綜合利用前景十分廣闊。劍麻斑馬紋病和劍麻莖腐病是當前我國劍麻生產(chǎn)上最嚴重的毀滅性的傳染性病害，可造成植麻區(qū)麻株大量死亡，產(chǎn)量大幅降低。且由于劍麻是多年生植物，生命周期較長，一般8年以上才能開花，再加上我國目前劍麻育種基礎薄弱，種質(zhì)資源少，給劍麻的雜交育種帶來了很大困難。因此通過構建劍麻的再生體系，進而開展抗病基因轉(zhuǎn)化研究，縮短劍麻抗病育種年限，提高育種時效，培育多抗高產(chǎn)品種，對促進我國劍麻產(chǎn)業(yè)

2、的穩(wěn)步發(fā)展具有重要的意義。 本文采用植物組織培養(yǎng)技術，以劍麻幼葉為外植體，進行了愈傷組織的誘導試驗，并成功的誘導出苗，建立了從愈傷組織到植株的再生體系，并利用農(nóng)桿菌介導初步探索了劍麻遺傳轉(zhuǎn)化的研究，為下一步開展抗病基因?qū)耄嘤D(zhuǎn)基因劍麻抗病品種提供基礎。 主要研究結果如下： 1.幼嫩的劍麻葉片愈傷誘導率較老的葉片高，且誘導出的愈傷分化率高。 2.愈傷組織在N6培養(yǎng)基中比在MS培養(yǎng)基中啟動快。幼嫩葉片(葉

3、齡2～3周)在N6培養(yǎng)基上27d即出現(xiàn)白色晶體狀愈傷組織點。 3.對劍麻葉片在附加不同質(zhì)量濃度配比的NAA、6-BA、2,4-D的N6培養(yǎng)基中進行愈傷誘導實驗，結果表明N6+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L，N6+NAA0.2mg/L+6-BA3.0～4.0mg/L+2,4-D0.5～1.0mg/L對劍麻葉片愈傷組織誘導效果優(yōu)于其它濃度配比。 4.高濃度的細胞分裂素6-BA和低濃度的生長素NAA配合使用能促進

4、愈傷誘導出芽，而用TDZ代替6-BA效果更顯著，可以加速出芽的時間。本研究中誘導愈傷組織出芽的最優(yōu)培養(yǎng)基是MS+NAA0.05mg/L+TDZ1.5mg/L。 5.劍麻不定芽增殖培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基為MS+NAA0.05mg/L+6-BA2.0mg/L，分化不定芽最多，增殖系數(shù)達4.4，且增殖芽長得較壯。 6.劍麻生根的最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+IAA1.0mg/L，12天左右便能長出須狀根，生根率達96％，且根多、較短粗、葉色濃綠