廣譜抗?。℅O）基因轉入水稻恢復系的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究通過有性雜交方式將葡萄糖氧化酶(GlucoseOxidase，GO)基因從粳稻(OryzasativaL.ssp.japonica)日本晴(Nipponbare)轉入秈稻(O.sativassp.Indica)蜀恢162(shuhui162)，經RT-PCR分子鑒定和淀粉-KI顯色反應確定GO基因已導入秈稻蜀恢162。GO基因秈稻蜀恢162F1分別與樂恢188和縉恢21進行有性雜交。采用生理生化方法對GO基因秈稻蜀恢162F1及其

2、復交F1材料葉片進行過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、超氧化物岐化酶(SOD)活性檢測和POD同工酶電泳分析。抗性鑒定稻瘟病菌誘發(fā)的GO基因蜀恢162F1及其復交F1。結果如下： (1)RT-PCR分子鑒定結果證明了有性雜交方式在水稻亞種間轉GO基因的可行性，GO基因已在分子水平整合和轉錄進蜀恢162基因組；淀粉-KI顯色反應結果說明GO基因已在蛋白質水平表達。 (2)無論是經稻瘟病誘發(fā)的植株，還是未經稻瘟病誘

3、發(fā)的植株，GO基因秈稻蜀恢162F1及其復交Fl材料葉片的POD、CAT、SOD活性均比對照提高；未感病植株材料葉片POD、CAT、SOD活性高于感病植株材料葉片；轉基因植株POD同工酶電泳條帶顯色比非轉基因植株更深。說明GO基因已在秈稻蜀恢162F1中蛋白質水平表達并發(fā)揮作用；GO基因已轉入復交F1材料并發(fā)揮抗病作用。 (3)葉瘟病抗性鑒定：轉基因秈稻蜀恢162F1抗性評價為中抗(MR)，而對照為高感(HS)。日本晴(GO)/

4、蜀恢162//樂恢188F1植株中有80％表現(xiàn)為抗(R)，而對照高感(HS)為79％。日本晴(GO)/蜀恢162//縉恢21F1植株中有78％為抗(R)，而對照中感(MS)為25％，感(S)為31％，高感(HS)為22％。經DPS分析，除日本晴(GO)/蜀恢162//縉恢21F1植株中有1個株系外，其余株系均與對照存在顯著性差異關系。日本晴(GO)/蜀恢162//縉恢21F1的病情指數(shù)高于日本晴(GO)/蜀恢162//樂恢188F1的病

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