Zwittermicin A對(duì)Cry1Ac殺蟲(chóng)作用增效機(jī)理的初步研究.pdf

1、Zwittermicin A(ZwA)是由蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus，Bc)和蘇云金桿菌產(chǎn)生的一種新型廣譜的抗生素，是已知唯一的線(xiàn)性氨基多元醇類(lèi)抗生素，該抗生素對(duì)多種真核微生物和原核微生物有抑制作用，對(duì)蘇云金桿菌殺蟲(chóng)晶體蛋白CrylAc的殺蟲(chóng)活性具有增效作用，但作用機(jī)理尚不清楚。 本研究分別從組織病理學(xué)、分子生物學(xué)及生物化學(xué)角度對(duì)ZwA的增效機(jī)理進(jìn)行了初步研究。 首先利用等電點(diǎn)沉淀法提取CrylAc蛋白

2、，通過(guò)ZwA與CrylAc蛋白分別和共同飼喂甜菜夜蛾幼蟲(chóng)(Spodoptera exigua Hubner，S.exigua)，證明了ZwA的殺蟲(chóng)增效活性。用CrylAc蛋白單獨(dú)飼喂甜菜夜蛾初孵幼蟲(chóng)，體重抑制活性明顯，殺蟲(chóng)活性較低；單獨(dú)用ZwA處理時(shí)無(wú)殺蟲(chóng)活性。當(dāng)ZwA濃度為0.1mg/mL、CrylAc濃度為1 mg/mL時(shí)，48 h校正死亡率達(dá)90％。對(duì)甜菜夜蛾五齡幼蟲(chóng)進(jìn)行生物測(cè)定，當(dāng)用25gg ZwA和5μgCrylAe分別飼喂試

3、蟲(chóng)時(shí)，無(wú)殺蟲(chóng)活性；用25μg ZwA和5μg CrylAc同時(shí)飼喂試蟲(chóng)時(shí)，84h試蟲(chóng)全部死亡。 對(duì)甜菜夜蛾五齡幼蟲(chóng)中腸組織切片分析發(fā)現(xiàn)，幼蟲(chóng)口服25μg ZwA和5μg Cryl Ac的幼蟲(chóng)12h時(shí)，中腸變細(xì)小，中腸壁變厚，且有裂解現(xiàn)象，圍食膜無(wú)法正常形成；24h和36h時(shí)中腸壁逐漸恢復(fù)正常，圍食膜重新形成，食物量增多。體外條件下，用等量的1％ZwA和1％幾丁質(zhì)親和分子(Calcofluorl)分別處理甜菜夜蛾圍食膜，Calco