基于雙向凝膠電泳的胰腺癌胰液比較蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文基于雙向凝膠電泳的胰腺癌胰液比較蛋白質(zhì)組研究姓名：田美申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：崔亞洲20080328山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文進(jìn)行分離和鑒定。結(jié)果：建立了高分辨率的人胰液蛋白表達(dá)譜，共鑒定了91個(gè)非冗余的胰液蛋白，并對(duì)91個(gè)蛋白進(jìn)行了功能注釋(諸如：分子功能，生物學(xué)過程及亞細(xì)胞定位等)分析。結(jié)論：胰液蛋白表達(dá)譜為胰腺癌潛在生物標(biāo)志物的研究提供了基礎(chǔ)，也增加了我們對(duì)胰腺疾病的病理生理

2、機(jī)制的理解。關(guān)鍵詞：人；胰液；蛋白；表達(dá)譜第二部分基于2DDIGE的胰腺癌胰液比較蛋白質(zhì)組研究目的：利用比較蛋白質(zhì)組學(xué)方法鑒定和篩選早期診斷胰腺癌的蛋白標(biāo)志物。方法：采用雙向熒光差異凝膠電泳(2DDIGE)技術(shù)分離來自于9例胰腺導(dǎo)管腺癌和9例非胰腺癌患者的胰液標(biāo)本，利用基質(zhì)輔助激光解吸離子化飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(MALDI—TOF_MSMS)對(duì)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。采用免疫印跡和免疫組織化學(xué)方法進(jìn)一步驗(yàn)證差異蛋白質(zhì)枷P9和DJ1在胰液和胰腺癌

3、組織中的表達(dá)水平。結(jié)果：建立了胰腺癌與非胰腺癌胰液的2DDIGE蛋白表達(dá)圖譜，經(jīng)質(zhì)譜檢測共鑒定出24個(gè)差異蛋白點(diǎn)，均出現(xiàn)20倍以上的表達(dá)差異，其中14個(gè)蛋白點(diǎn)在胰腺癌胰液中是上調(diào)的，10個(gè)蛋白點(diǎn)是下調(diào)的。免疫印跡檢測顯示MMP9和DJ—l這兩個(gè)蛋白在胰腺癌胰液中高表達(dá)。免疫組織化學(xué)檢測顯示刪P一9和DJ1在胰腺癌組織的細(xì)胞胞漿內(nèi)均高表達(dá)，陽性率分別為824％和725％。另外，DJ—l的差異表達(dá)與胰腺導(dǎo)管腺癌的分化程度有關(guān)。DJ1的表達(dá)水