乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中P-gp、GST-π、ToPoⅡa、TS的表達及意義.pdf

1、目的：乳腺癌的常用治療手段包括手術(shù)、放療、化療、內(nèi)分泌治療等。其中化療能夠降低乳腺癌患者術(shù)后局部復(fù)發(fā)及遠處轉(zhuǎn)移率，仍是目前治療乳腺癌主要的輔助手段。但由于腫瘤對藥物的原發(fā)性耐藥，乳腺癌患者對化療的敏感性差別很大。腫瘤細胞的多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是直接影響化療效果的主要原因。MDR是指由一種藥物誘導(dǎo)腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥后，腫瘤細胞不僅對引起耐藥的原藥耐藥，同時對其他多種結(jié)構(gòu)和作用機制完全不同的藥物產(chǎn)生交叉

2、耐藥的現(xiàn)象。腫瘤細胞MDR的產(chǎn)生與多種機制有關(guān)。 本實驗通過常規(guī)形態(tài)觀察和免疫組織化學(xué)染色等方法，檢測56例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中多藥耐藥基因表達產(chǎn)物P糖蛋白(P-gp)以及谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST-π)、拓撲異構(gòu)酶Ⅱ(ToPo Ⅱa)、胸苷酸合成酶(TS)的表達情況，同時結(jié)合c-erbB-2的表達，探討它們在乳腺癌組織中的表達情況及其與腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 方法：采用河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院

3、病理科2004-2007年間存檔的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌標本56例，同時選取乳腺腺病及乳腺纖維腺瘤各10例良性病變作為對照，將所有蠟塊連續(xù)切片(4μm)十一張，進行常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)染色。利用特異性抗體檢測不同基因蛋白P-gp、GST-π、ToPo Ⅱa、TS、c-erbB-2的表達情況。免疫組織化學(xué)染色采用SP法，DAB顯色。本研究中采用的免疫組化顯色系統(tǒng)為DAB顯色系統(tǒng)，陽性結(jié)果為在相應(yīng)的部位顯示棕黃色顆粒。P-gp陽性顆粒分布于

4、胞膜、胞漿；GST-π陽性顆粒分布于胞漿；TS陽性顆粒位于胞漿；ToPoⅡα陽性顆粒分布于胞核；c-erbB-2顆粒分布于胞膜，以細胞膜呈清晰的棕黃色為陽性，僅胞漿內(nèi)和胞核內(nèi)著色不作陽性判斷依據(jù)。 隨機計數(shù)10個高倍視野的癌細胞，P-gp、GST-π、TS、c-erbB-2以陽性細胞數(shù)<10％為陰性，10～25％為(+)，25～75％(++)；ToPo Ⅱα要求記數(shù)細胞數(shù)目為500或1000個，計算陽性細胞的百分率，據(jù)此分為四級

5、：Ⅰ級陰性，陽性細胞<25％；Ⅱ級(++)陽性細胞25％-49％；Ⅲ級(+++)陽性細胞50％～74％；Ⅳ級(++++)陽性細胞≥75％。 判斷標準以P-gp、GST-π、TS、c-erbB-2≥兩個加號具有診斷價值：ToPo Ⅱα≤一個加號具有診斷價值。 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包。 結(jié)果：在乳腺癌組織和對照的良性乳腺病變組織內(nèi)，P-gp、GST-π、ToPo Ⅱα、TS、c-erbB-2均有不

6、同程度的表達。 1.P-gp的表達：乳腺癌組織內(nèi)P-gp的陽性表達率為46％(26/56)，對照組陽性率為7/20(35％)，其表達率在二組間無顯著差異(P>0.05)。P-gp表達與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、TNM分期無明顯關(guān)系(P>0.05)。 2.GST-π的表達：56例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中GST-π陽性率為62％(35/56)，對照組為3/20(15％)。表達率在二組間有顯著差異(P<0

7、.01)。統(tǒng)計分析表明GST-π的表達與患者的年齡、腫瘤大小、臨床分期無統(tǒng)計學(xué)意義，僅與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計學(xué)意義。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者GST-π陽性率71％(27/38)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者44％(8/18)，二組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 3 TS的表達：對照組TS陽性率為1/20(5％)。在56例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織內(nèi)的陽性表達率為43％(24/56)，其表達率在二組間組有顯著差異(P<0.01)。TS的表達與患者的年齡、腫瘤大小、臨

8、床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 4 ToPoⅡα的表達：56例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織內(nèi)的陽性率為64％(36/56)，在對照組中陽性率為15/20(75％)，其表達率在二組間無顯著差異(P>0.05)。本研究統(tǒng)計分析結(jié)果表明ToPo Ⅱα的表達與患者的年齡、腫瘤大小無關(guān)，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者ToPo Ⅱα陽性率55％(21/38)低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者83％(15/18)，二組相比有統(tǒng)計學(xué)意

9、義(P<0.05)。ToPo Ⅱα陽性率與臨床分期有關(guān)，臨床分期越高其表達率越低，臨床分期Ⅰ、Ⅱ之間表達無差別，臨床分期Ⅰ+Ⅱ與Ⅲ表達率有差別(P<0.05)。 5 c-erbB-2的表達：可見棕黃色顆粒分布于胞膜上。c-erbB-2主要表達在良性病變的乳腺導(dǎo)管和腺上皮細胞以及乳腺癌內(nèi)的癌細胞胞膜。c-erbB-2在乳腺癌中陽性率為43％(24/56)，在對照組中陽性率為2/20(10％)，其表達率在二組間有顯著差異(P<0.0

10、1)。經(jīng)統(tǒng)計分析c-erbB-2陽性率與與患者的年齡、腫瘤大小無關(guān)，但是與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期均有統(tǒng)計學(xué)意義。 6.Pg-p、GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2相關(guān)性分析56例乳腺癌組織P-gp、GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2陽性表達率分別為：46％，62％，43％，64％，43％；20例對照中分別為：35％、15％、5％、75％、10％。P-go、ToPoⅡα的表達率在二組間差異無統(tǒng)計意義(P>0.05

11、)，GST-π、TS、c-erbB-2表達差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。 乳腺癌組織中P-gp和GST-π、TS、ToPoⅡα、c-erbB-2的表達有相關(guān)性(X2為8.106，P<0.05)。 結(jié)論：檢測乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織內(nèi)P-gp和GST-π、TS、ToPoⅡα的表達對腫瘤化療藥物的選擇具有重要臨床意義；耐藥蛋白的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等相關(guān)。 1.P-gp、ToPoⅡα在乳腺癌中的表達率與良性病變